Эффективность лекарственного средства для животных

Безопасность и качество лекарственных средств для животных

Цель изучения эффективности лекарственных средств — получение научными методами оценок и доказательств эффективности и безопасности лекарственных средств, данных об ожидаемых побочных эффектах от применения лекарственных средств в условиях хозяйств, клиник, лабораторий.

Оценку эффективности лекарственных средств проводят организации — разработчики лекарственных средств и/или организации — производители лекарственных средств с участием ветеринарных специалистов хозяйств, клиник, лабораторий. Для организации и проведения исследований могут привлекаться исследовательские организации, имеющие необходимую материально-техническую базу, квалифицированных специалистов и проводящие оценку эффективности лекарственных средств в соответствии с техническим регламентом.

Требования к безопасности и качеству товаров устанавливаются на этапах их проектирования и разработки и обеспечиваются соответствующими материально-техническим снабжением, разработкой и организацией производства, рабочим и окончательным контролем, правильным хранением и своевременной реализацией. Перед отпуском потребителю требования к качеству оцениваются по нормам, регламентируемым стандартами или ТУ, или в соответствии с запросами потребителей. В нормативных документах устанавливаются требования к свойствам и показателям, обусловливающим качество. Различают безопасность потребления и экологическую безопасность.

Безопасность потребления определяется отсутствием следующих вредных факторов: травматического воздействия на организм (механического, теплового, химического и др.); выделения вредных для организма веществ, в том числе токсических, аллергических, канцерогенных, мутагенных и т. п.; специфических побочных эффектов и противопоказаний, связанных с особенностями свойств конкретных лекарств; лекарственной зависимости, синдрома отмены лекарственного средства.

Под безопасностью ветеринарных препаратов понимается состояние обоснованной уверенности, что они безопасны при обычных условиях использования, не являются вредными, не представляют опасности для здоровья и продуктивности нынешних и будущих поколений животных и не влияют на окружающую среду.

Вопросы экологической безопасности ветеринарных препаратов рассматриваются при их изготовлении, транспортировании, хранении, переработке, потреблении и утилизации.

Безопасность потребления и экологическая безопасность обязательны для утверждения образца товара к производству и определения возможности его функционирования в системе «живой организм — товар — среда».

Качество товаров — одна из его основополагающих характеристик, решительным образом влияющая на выбор потребителя и формирование конкурентоспособности. Это обусловлено сущностью категории качества.

Качество — совокупность характеристик объекта, относящихся к его способности удовлетворять установленные и предполагаемые потребности.

Обычно потребности выражаются через определенные характеристики на основе установленных критериев, которые формулируются в виде требований к качеству.

Требования к качеству — выражение определенных потребностей или их перевод в набор количественно или качественно установленных требований к характеристикам объекта, чтобы дать возможность их реализации и проверки.

Управление качеством товаров — установление, обеспечение и поддержание необходимого уровня качества ветеринарных препаратов при их разработке, производстве, транспортировании, хранении и потреблении. Достижение необходимого уровня качества осуществляется путем контроля качества и целенаправленного воздействия на условия и факторы, влияющие на потребительские свойства товара. В настоящее время в нашей стране разрабатываются и внедряются заводские, отраслевые и территориальные комплексные системы управления качеством продукции.

Стандартизация — основа управления качеством продукции. Управление качеством ветеринарных препаратов осуществляется на основе международных стандартов серии ИСО 9000 и серии GxP.

Комплексная система управления качеством продукции (КСКП) базируется на стандартах предприятий, которые разрабатываются в соответствии с государственными и отраслевыми стандартами, учитывают специфику предприятия и привязаны к конкретным условиям. Стандарты предприятий строго регламентируют проведение всех организационных, технических и экономических мероприятий по повышению качества продукции.

Комплексность системы проявляется и в том, что она позволяет управлять качеством продукции на стадиях разработки, производства, реализации и потребления.

Сама КСКП разработана в медицинской промышленности. Ее цель состоит в создании высокого уровня качества продукции при минимальных затратах. В фармацевтической промышленности достичь этого можно внедрением международных требований GxP и разработкой новых отечественных препаратов, отвечающих требованиям лучших зарубежных образцов, а также обновлением ассортимента, если снять с производства устаревшую продукцию и внедрить новейшие достижения науки и техники.

Показатель качества — количественное и качественное выражение свойств продукции (или товара). Каждый показатель имеет наименование и значение. Наименование показателя служит качественной характеристикой товара. Значение показателя является результатом количественного и качественного измерения (объема, дозировки). Значение показателя применяется для установления соответствия или несоответствия определенным требованиям или для констатации результатов измерений.

Показатели качества по наименованиям делятся на группы в зависимости от характеризуемых свойств (единичные или комплексные) или от назначения (базовые и определяющие).

Единичные показатели предназначены для выражения простых свойств товаров (цвет, форма, запах, консистенция, кислотность).

Комплексные показатели предназначены для выражения сложных свойств товаров. Так, эффективность вакцин является комплексным показателем, включающим длительность иммунитета, вырабатываемого с помощью вакцины, специфичность, безвредность, реактогенность и др.

Базовые показатели приняты за основу при сравнительной характеристике показателей качества. Примером базового показателя может служить стандарт мутности бульона для определения количества микроорганизмов в живых вакцинах.

Как базовые могут быть использованы показатели образцов аналогичной продукции, отражающие передовые научно-технические достижения.

Определяющие показатели имеют решающее значение при оценке товаров. К ним в товароведении относятся органолептические показатели — внешний вид, цвет, вкус, запах, а также форма и агрегатное состояние лекарственных препаратов.

Свойство — объективная особенность продукции (или товара), проявляющаяся при ее создании, оценке, хранении и потреблении. Свойства продукции могут быть простыми и сложными.

Простое свойство характеризуется одной особенностью, например запахом, цветом, кислотностью и др.

Сложное свойство — комплекс особенностей, проявляющихся в совокупности. Примером сложного свойства могут служить биопрепараты, включающие целый комплекс свойств — консистенцию (жидкую, сухую), депо, стерильность, активность, безопасность и др.

Выбраковка фармацевтических товаров для животных, не отвечающих требованиям качества и безопасности, является важной задачей ветеринарного персонала. Особое место занимает брак, выявляемый у лекарственных средств контрольно-аналитическими лабораториями. Чаще всего лекарственные средства бракуют по несоответствию таких показателей, как срок годности, целостность упаковки, количественное содержание, описание, подлинность, микробиологическая чистота, механические включения, маркировка, посторонние примеси (осадок), цветность и прозрачность лекарственных жидкостей, однородность, адсорбционная способность, pH.

Среди лекарственных форм на первом месте по количеству рекламаций стоят таблетки, драже, капсулы и гранулы. На втором месте находятся лекарственные формы для инъекций и инфузий. Затем идут мази, пасты, линименты, суппозитории и др.

Наиболее частыми причинами рекламаций являются диспропорция числа производителей, поставщиков лекарственных средств и контрольных возможностей соответствующих служб, большое количество регистрируемых ЛC, недостатки в организации производства, несоблюдение технологии производства и санитарного режима.

Эффективность, качество и безопасность лекарственных средств напрямую зависят от таких факторов, как качество исходного сырья (субстанции), условий производства, хранения, транспортирования, реализации, потребления и утилизации. Состав и свойства субстанций, в свою очередь, определяются его происхождением (минерального, растительного, животного, биотического, синтетического).

КАЧЕСТВО ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ ЖИВОТНЫХ

Качественные и количественные характеристики товаров формируются на стадиях технологического цикла. Эффективность, отсутствие вредных факторов и стабильность ЛС обеспечиваются прежде всего соблюдением требований стандартов и регламентов на предтоварной стадии их производства, а также аналитическим контролем научной разработки и производства таких средств.

Стандартизация в производстве лекарственных препаратов позволяет гарантировать потребителю стабильность свойств, качество и безопасность лекарственных средств и безопасность для участников производства и окружающей среды. Стандартизация включает разработку производственных регламентов, объединенных общим понятием «технологические регламенты производства». Такие регламенты относятся к виду специальных.

Технологический регламент производства — нормативный документ, устанавливающий методы производства, технологические нормативы, технические средства, условия и порядок проведения технологического процесса в производстве фармацевтической продукции, обеспечивающий получение лекарственного средства с показателями качества, отвечающими требованиям фармакопейной статьи предприятия (техническим условиям), а также устанавливающий безопасность ведения работ и достижение оптимальных технико-экономических показателей конкретного производства.

Регламент производства лекарственного средства используют в качестве основного технологического документа при:

отработке технологии в процессе разработки и постановки новых лекарственных средств на производство;

проведении технологических процессов и серийном производстве;

разработке технологических инструкций;

составлении производственных инструкций по требованиям безопасности, промышленной санитарии и противопожарным мероприятиям;

разработке и осуществлении мероприятий по утилизации отходов производства, обезвреживанию и очистке промышленных стоков и выбросов в атмосферу;

установлении технико-экономических нормативов, в том числе норм расхода сырья и материалов;

составлении исходных данных для проектирования промышленного производства.

Технологический регламент подразделяется на следующие категории:

лабораторный регламент (ЛР);

опытно-промышленный регламент (ОПР);

пусковой (временный) регламент (ПУР);

промышленный регламент (ПР).

Лабораторный регламент — технологический документ, которым завершаются научные исследования в лабораторных условиях при разработке метода производства новых лекарственных средств. Лабораторный регламент используется при проектировании и эксплуатации опытно-промышленной установки, создаваемой для отработки новой технологии производства лекарственного средства и наработки нового вещества для клинических испытаний.

Опытно-промышленный регламент — технологический документ, которым завершается отработка новой технологии производства лекарственного средства на опытно-промышленной установке. Он используется для изготовления и испытания опытных образцов (партий) новых лекарственных средств в полупроизводственных условиях, отработки качественных показателей нового лекарственного средства, вводимых в нормативную документацию (ФСП, технические условия) и при составлении данных для проектирования промышленного производства новой продукции. При выпуске небольших партий нового лекарственного средства (от нескольких сотен граммов до 1 кг в год) и сохранении этого количества в течение длительного периода допускается работа на основе ОПР с пересмотром документа каждые три года.

Пусковой (временный) регламент — технологический документ, на основании которого осуществляют ввод в эксплуатацию и освоение вновь созданного промышленного производства лекарственного средства. Его составляют на основе опытно-промышленного регламента и проектной документации на производство этой продукции, а также на основе действующих производств, в технологию которых вносятся принципиальные изменения. Срок действия пускового (временного) регламента в производстве — до трех лет.

В случае производства нового лекарственного средства по имеющейся на предприятии технологической схеме разработка регламента может быть осуществлена на основании лабораторного регламента.

Промышленный регламент — технологический документ действующего серийного производства лекарственного средства. Промышленный регламент составляют на основе пускового (временного) регламента после внесения в него изменений и дополнений, принятых при освоении производства. Исключение составляют регламенты, разработанные на производство лекарственных средств одного наименования разных дозировок (не более трех), выпускаемых по одному стандарту на однотипном оборудовании, а также регламенты на упаковку готовых лекарственных средств и производство фасованного лекарственного растительного сырья (трава, цветки, корни и т. п.) (не более трех).

Допускается составление промышленного регламента с включением нескольких технологических линий однотипного оборудования при простых технологических процессах производства одного вида продукции, выпускаемого по одной технологической схеме. В этом случае на каждый препарат должны разрабатываться отдельные технологические инструкции.

Серийный выпуск товарной продукции осуществляется на основе пускового (временного) и промышленного регламентов. Продукция, нарабатываемая в процессе отработки данных регламентов, может быть реализована в установленном порядке при соответствии ее требованиям утвержденной нормативной документации на эту продукцию.

Выполнение требований технологического регламента должно обеспечивать заданное качество выпускаемой продукции, оптимальный технологический режим, рациональное использование материальных, топливно-энергетических и трудовых ресурсов, правильную эксплуатацию и сохранность оборудования, исключение возможности возникновения аварий и загрязнения окружающей среды, безопасность ведения производственного процесса.

СИНТЕТИЧЕСКИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА

Качество готового продукта во многом определяется качеством исходного сырья. У производителя лекарственных средств требования к исходным материалам синтетических фармацевтических производств устанавливаются технологическим регламентом, конечной категорией которого является промышленный регламент. Стандартом для этих целей служит ОСТ 64-02-003—2002 «Продукция медицинской промышленности». Требования, регламентирующие качество сырья, материалов и полупродуктов, применяемых в производстве лекарственных средств, заносятся в промышленный регламент в раздел «Показатели, обязательные для проверки» и содержат следующие данные: описание, растворимость, подлинность (основного и вспомогательного сырья), прозрачность раствора, удельное оптическое вращение, светопоглощающие примеси, pH растворов, вода, сульфатная зола и тяжелые металлы, остаточные растворители, посторонние примеси, триэтиламин, микробиологическая чистота, токсичность, количественное содержание.

Описание — устанавливаются показатели внешнего вида лекарственного средства (физическое состояние, цвет, запах), возможные изменения при хранении на воздухе, на свету (указание на гигроскопичность, отношение к действию света и воздуха). Для лекарственных средств ядовитых и сильнодействующих запах не указывается.

Растворимость — указываются показатели растворимости в воде, 95%-ном растворе спирта, хлороформе и эфире (в случае, если субстанция в эфире практически нерастворима, его из перечня растворителей исключают). При необходимости указывают другие растворители. В тех случаях, когда установлена точная растворимость лекарственного средства, приводится соотношение массы растворенного вещества и объема растворителя.

Подлинность — указываются характеристики ультрафиолетового и инфракрасного спектров поглощения и при необходимости наиболее специфичные для данного препарата две-три реакции.

Прозрачность раствора — проводится для определения концентрации.

Удельное оптическое вращение — указывается верхний и нижний предел этого показателя.

Светопоглощающие примеси — указывается верхний и нижний предел удельного показателя поглощения.

Показатель pH растворов — при установлении пределов кислотности или щелочности растворов с помощью индикаторов пользуются растворами кислот или щелочей концентрацией от 0,001 М до 0 М; pH определяют потенциометрически.

Вода — потери воды в массе при сушке определяются методом К. Фишера. Указываются навеска препарата, условия сушки и нормы потери в массе при высушивании, методика определения конца титрования по К. Фишеру и содержание влаги.

Сульфатная зола и тяжелые металлы — указываются допустимые пределы этих примесей, связанные с технологией производства, навеска препарата и допустимые пределы примесей сульфатной золы и тяжелых металлов. Показателями чистоты являются хлориды и сульфаты.

Остаточные растворители — должны быть указаны эталоны цветности, нормирующие допустимое количество органических примесей или хроматографические методы. Контроль остаточных количеств растворителей вводится в случае использования органического растворителя на последней стадии получения лекарственного средства.

Посторонние примеси — приводится методика обнаружения и допустимые нормы содержания соединений технологического характера или образовавшиеся в процессе хранения. При использовании для этих целей хроматографических методов следует указывать вид сорбента, состав фаз, количество хроматографируемого испытуемого вещества, количество стандартного образца (свидетеля), время хроматографирования, реактив, применяемый для проявления, а также другие условия, определяющие процесс хроматографии.

Триэтиламин — указываются тест-дозы, способы введения и срок наблюдения для испытуемых лекарственных средств.

Микробиологическая чистота — описывается метод определения микроорганизмов и их допустимые пределы.

Токсичность — указываются тест-дозы, способы введения и срок наблюдения для испытуемых лекарственных средств.

Количественное содержание — дается описание метода количественного определения основного вещества, содержащегося в препарате, а также процентное содержание основного вещества или активность в единицах действия в миллиграмме (ЕД/мг) при пересчете в активное вещество.

На промежуточные продукты, являющиеся в данном производстве (цехе) конечной продукцией, а также в случае применения одного промежуточного продукта для нескольких производств (например, циануксусный эфир в производстве витаминов, производство воды для инъекций, чистого воздуха и т. п.) составляются, по усмотрению изготовителя, самостоятельные (отдельные) промышленные регламенты. Во избежание возможных ошибок в процессе промышленного производства лекарственных средств не допускается составление и утверждение групповых регламентов даже в производстве с простыми технологическими процессами и однотипным оборудованием (таблетирование, ампулирование, изготовление мазей, капсул, настоек и т. п.).

Аналитический контроль при производстве синтетических лекарственных средств. Создание высокоэффективных и безопасных синтетических лекарственных средств, отвечающих требованиям стандартов, требует комплексного решения проблем на этапах поиска оптимальных методов синтеза фармакологически активных веществ, исследования их физико-химических и химических свойств, изучения биологической активности и токсичности, разработки технологии и организации производства готовой продукции. На всех этих этапах необходимо проведение аналитического контроля с применением надежных методов исследования и анализа (Е. В. Дегтерев, 2002).

Создание и производство синтетических лекарственных средств осуществляются в три этапа.

Научно-исследовательский этап включает: поиск схемы синтеза, наработку лабораторных образцов, биологические испытания, составление лабораторной прописи, уточнение и оптимизацию схемы синтеза, предварительную оценку показателей качества.

Производственный этап включает: создание лабораторного и опытно-промышленных регламентов, разработку нормативной документации (фармакопейные статьи, фармакопейные статьи предприятия).

Методы анализа: микроанализ, масс-спектрометрия, ядерный магнитный резонанс (ЯМР), инфракрасная (ИК) и ультрафиолетовая (УФ) спектрометрии, фотометрия (высокоэффективная газожидкостная хроматография — ВЭЖХ), газовая хроматография, тонкослойная хроматография, полярография, титриметрия, гравиметрия, биологические методы и др.

На первом этапе химико-фармацевтического исследования используется полный набор аналитических методов для получения максимальной информации о превращениях исходного продукта в целевой продукт. Итоговым документом научно-исследовательского этапа создания лекарственных средств является лабораторная пропись, содержащая исходные данные для составления технологических регламентов по сырью, описание всех стадий процесса получения конечного продукта и условий их проведения, показатели его качества, характеристики полупродуктов и др.

На производственных этапах (материально-техническое снабжение, приемочный контроль сырья, производство продукции, окончательный контроль готовой продукции) на основе полученной научно-исследовательской информации разрабатываются конкретные оптимальные методики аналитического контроля производства и показателей качества лекарственных средств.

При разработке научно обоснованных аналитических методик применительно к конкретным анализируемым объектам (состав, назначение и применение) руководствуются известными критериями выбора подходящего аналитического метода. Основные из них: информативность, специфичность, чувствительность, воспроизводимость и правильность, оперативность, экономичность.

На научно-исследовательском этапе (проектирование и разработка продукции) поиска и изучения фармакологически активных соединений, где для получения достоверной информации от методик требуется высокая чувствительность и специфичность, используются элементный микроанализ, ЯМР-спектроскопия, ИК-и УФ-спектрометрия, масс-спектрометрия, методы разделения, в частности хроматографические, микробиологические, ферментативные, а также классические методы аналитической химии (титриметрические, гравиметрические, биологические и др.).

Если объектом исследования является новое лекарственное средство, то его фармакологическое действие изучают в ходе доклинических испытаний. Если объект — воспроизводимое лекарственное средство (дженерик), то его испытывают на биодоступность и биоэквивалентность, проводя фармакокинетические исследования с применением физико-химических методов (ЯМР, масс-спектрометрия, хромато-масс-спектрометрия, высокоэффективная жидкостная хроматография), а также иммунологических и микробиологических методов, отвечающих требованиям специфичности, воспроизводимости и правильности.

В настоящее время происходит смещение акцента с анализа готовой продукции на аналитический контроль производства, т. е. качество должно быть заложено в продукт и контролироваться в процессе производства. Это означает, что аналитический контроль производства лекарственных средств должен проводиться в полном соответствии с действующей нормативной документацией: ТУ, ГОСТами на сырье и материалы, разделами технологических регламентов «Контроль производства», стандартами предприятия на полупродукты, производственными инструкциями, фармакопейными статьями и др.

Изучение позиции аналитического контроля в процессе управления технологическими процессами позволило определить взаимосвязь между отдельными его функциями в общей системе производства и при разработке технической документации.

Производственные этапы отражаются в последовательно разрабатываемых регламентах (лабораторном, опытно-промышленном и промышленном), подход к составлению которых в части аналитического контроля базируется на общих требованиях к технической документации.

Вместе с тем общие рекомендации не могут детализировать конкретные требования к аналитическому контролю, поскольку многообразие технологий производства лекарственных средств, большая номенклатура химических соединений, участвующих в синтезе, создают высокую степень вариации различных смесей, требующих определения их состава. По этой причине возникает необходимость в многочисленных нестандартных методиках анализа, основанных на различных физико-химических и химических методах.

Целесообразно систематизировать задачи аналитического контроля по этапам создания лекарственных средств. Такая систематизация может быть проведена по принципу, на основании которого направление разработки схемы аналитического контроля подчиняется требованиям технологических регламентов для каждого этапа создания лекарственного средства. Иногда используется также принцип преемственности разрабатываемых методик анализа при переходе от лабораторного регламента к опытно-промышленному, когда методики, принятые в лабораторном регламенте, трансформируются в опытно-промышленном регламенте и получают окончательную редакцию и характеристики в промышленном регламенте.

На основании исходных данных лабораторной прописи для составления лабораторного регламента проводятся исследования по окончательному выбору схемы синтеза лекарственного вещества. При этом подбираются также методы анализа, позволяющие по ходу процесса исследовать химические превращения и устанавливать структуры побочных и промежуточных продуктов на всех стадиях синтеза. Предпочтение отдается универсальным методам анализа, обеспечивающим наибольшую информативность: ЯМР, хромато-масс-спектрометрия, ИК- и УФ-спектрометрия, тонкослойная хроматография, ВЭЖХ, полярография и др. Разработка процедуры проводится в следующем порядке:

1. Подготовка исходного сырья.

2. Изучение требований к составу исходного сырья.

3. Качественный и количественный анализ примесей.

4. Предварительная методика.

5. Статистическая обработка.

6. Межлабораторная аттестация.

7. Получение полупродуктов.

8. Изучение механизма и кинетики реакций.

9. Структурный анализ промежуточных и побочных соединений.

10. Предварительная разработка контрольных точек по стадиям процесса.

11. Научный отчет с предложениями по контрольным точкам не аттестуется.

12. Выделение и очистка полупродуктов.

13. Изучение требований к составу полупродуктов.

14. Определение содержания основного вещества и примесей.

15. Лабораторная аттестация.

16. Регенерация растворителей.

17. Выбор способов регенерации.

18. Анализ растворителей.

19. Выделение конечного продукта.

20. Выбор способов очистки от примесей.

21. Определение содержания основного вещества и отдельных примесей.

22. Предварительные методики для разработки нормативной документации.

23. Статистическая обработка.

24. Межлабораторная аттестация.

Такой подход обусловлен тем, что на данном этапе разработки регламента рассматриваются различные варианты сырья и полупродуктов, оптимизируются (в масштабах лабораторного регламента) технологические параметры (температура, продолжительность реакции, pH и т. п.), определяется максимальное число контрольных точек, исследуется влияние природы и количества примесей на последующие процессы и определяется требуемая степень очистки полупродуктов, а иногда и исходного сырья.

Применительно к химическому синтезу лекарственных веществ принята обобщающая схема разработки аналитического контроля для лабораторного регламента.

Как следует из приведенной схемы, разработка процедуры аналитического контроля для лабораторного регламента методологически сочетается с исследованиями технологических процессов, реализуемых на лабораторном оборудовании. Определение технологических параметров процессов синтеза в этом случае осуществляется также с помощью лабораторных приборов, имеющих широкий диапазон измерений. Поскольку на заключительном этапе разработки лабораторного регламента формируются основы технологических стадий производства, методики постадийного контроля разрабатываются с учетом перехода к опытно-промышленному регламенту.

Параметры технологических процессов, записанные в лабораторном регламенте, проверяются на пилотной установке. При этом с применением методик анализа, заложенных в лабораторный регламент, уточняется состав реакционных смесей, требующий контроля, устанавливаются более узкие диапазоны измеряемых концентраций, определяются окончательные контрольные точки и периодичность анализов. На основе полученных результатов предварительно разработанные методики адаптируются к условиям опытно-промышленного производства. При отработке технологии в этом масштабе используется в основном оборудование и контрольно-измерительные приборы промышленного исполнения (pH-датчики, расходомеры, термометры, термисторы и т. д.).

Необходимым переходом от лабораторного регламента к опытно-промышленному является определение условий управления и стабилизации технологических процессов по величинам отклонений результатов анализа от нормативных значений. На практике технологу достаточно знать величину отклонения содержания ключевого компонента или какого-либо параметра процесса от норматива без излишней информации о полном составе реакционной смеси.

Для аналитического контроля на опытно-промышленном этапе производства целесообразно использовать простые, но надежные и производительные экспрессные методики анализа. Такие методики разрабатываются на основе неселективных методов (полярографии, рефрактометрии, кондуктометрии, редокс- и потенциометрии и т. п.), и они могут быть с успехом использованы для автоматического контроля и управления непрерывными и периодическими процессами. Очевидно, что исходные данные для создания экспрессных методик могут быть получены с помощью лабораторных методик, позволяющих находить зависимости состава реакционных смесей от физико-химических характеристик.

При выборе подходящего метода для аналитического контроля синтеза лекарственных веществ часто возникает проблема, присущая практике количественного определения многих целевых продуктов. Она связана с тем, что многие известные методики, особенно количественные, удовлетворяющие a priori основным требованиям, предъявляемым к аналитическому контролю, разработаны с использованием индивидуальных веществ без учета влияния примесей, всегда присутствующих в реакционных массах в широком интервале концентраций. Поэтому экспрессные и достаточно точные методы титриметрического анализа, прямые фотометрические методы далеко не всегда удается применить для определения содержания целевого продукта в реакционных массах и технических продуктах, а также в отходах производства.

Исключением могут быть случаи, когда, во-первых, удается найти специфическую реакцию (например, цветную или ферментативную) на целевой продукт; во-вторых, можно подобрать реагенты, маскирующие или исключающие влияние сопутствующих веществ, мешающих прямому определению целевого продукта; в-третьих, удается найти отличительное свойство определяемого продукта или такой параметр процесса, который не зависит от химического состава анализируемой пробы (чаще всего это физический или физико-химический параметр, например, редокс-потенциал). Заслуживает внимания кондуктометрический метод автоматического контроля в химико-фармацевтических производствах на стадиях приготовления растворов электролитов заданной концентрации, процессов разделения водно-органических слоев при экстракции и т. п.

Зарубежные фирмы выпускают целые комплексы и линии для анализа лекарственных препаратов по проточно-инжекционной схеме в производственных условиях. В основном это установки, снабженные фотометрическими, электрохимическими и хемилюминесцентными детекторами. Например, парацетамол (N-ацетил-n-аминофенол) количественно определяют в двухканальной проточно-инжекционной схеме со спектрофотометрическим детектированием; производительность аналитической системы 26 проб в час.

Достоинства проточно-инжекционного анализа очевидны: высокая производительность, автоматизация стадий пробоподготовки и измерения аналитического сигнала, легко осуществляемый переход от одного типа анализа к другому, возможность эффективного использования для контроля качества очистки жидких отходов производства, широкое применение в клиническом и фармацевтическом анализе.

Требованиям информативности, экспрессности и достоверности к постадийному аналитическому контролю более других отвечают методы анализа с предварительным разделением, прежде всего это различные варианты хроматографии. В настоящее время они чаще других включаются в технологические регламенты, фармакопейные статьи и другую нормативную документацию.

Из хроматографических методов наиболее доступным, получившим наибольшее распространение в контроле лекарственных средств, является тонкослойная хроматография. Метод не требует сложного аппаратурного оформления, какой-либо специальной подготовки персонала, относительно дешевый. Тонкослойная хроматография доступна и эффективна в тех случаях, когда возможности применения других хроматографических методов ограничиваются свойствами анализируемых объектов, например термолабильностью или малой летучестью соединений, присутствием большого количества мешающих анализу смол, солей, пигментов и т. п.

Метод предпочтителен для контроля за ходом процессов, протекающих в агрессивных средах, например реакции нитрования в производстве левомицетина, некоторых нитрофурановых препаратов. Широкое использование тонкослойной хроматографии обеспечено промышленным выпуском стандартных пластинок с закрепленным слоем сорбента (силикагеля, оксида алюминия, целлюлозы и т. п.). Наиболее распространены в аналитической практике силикагелевые пластинки зарубежного производства, а также отечественные пластинки «Сорбфил» производства ПКБ «Пластмаш» (г. Краснодар) и «Ленхром» (г. Санкт-Петербург).

Большая часть методик предписывает визуальную полуколичественную оценку путем сравнения пятен веществ с пятнами «стандартов свидетелей» по их размеру и интенсивности окраски, поглощения или флуоресценции пятен в УФ-свете. Гибридные методы, в частности хроматоспектрофотометрия и особенно хрома-тоденситометрия, позволяют проводить количественный анализ в производстве ряда лекарственных препаратов.

Кроме функции аналитического слежения за ходом технологического процесса метод тонкослойной хроматографии выполняет и другие аналитические задачи, а именно: он широко применяется для контроля полупродуктов, количественного определения примесей в технических продуктах и готовой продукции, а также для анализа состава маточников, кубовых остатков и других отходов в химико-фармацевтических производствах.

Все вопросы по аналитическому контролю окончательно отрабатываются на этапе составления опытно-промышленного регламента, так что при переходе к следующему производственному этапу уже имеется скорректированный промышленный регламент. Он устанавливает частоту анализов, методики, исполнителя и т. д., т. е. все нормы, которые предусмотрены ОСТом на составление технологических регламентов по разделу «Контроль производства».

Для надежного осуществления постадийного производственного аналитического контроля должны быть обеспечены следующие основные требования и условия:

правильный (оптимальный) выбор аналитического метода; обучение персонала аналитической службы;

снабжение необходимыми аттестованными и прошедшими поверку приборами определенного класса точности, обеспечение их оперативным и квалифицированным обслуживанием;

снабжение реактивами определенной квалификации чистоты, лабораторной посудой и т. д.

На практике нередки случаи нарушения «работы» аналитического контроля, даже если перечисленные требования выполняются. Причинами могут быть: использование нестандартного сырья; нарушения технологической дисциплины (на практике вероятность таких нарушений возрастает с увеличением числа технологических стадий производства); несовершенство или несоответствие технологическому регламенту оборудования, используемого в технологическом процессе; проведение процессов по совмещенным технологическим схемам, что характерно для производств, имеющих большую номенклатуру лекарственных препаратов.

Очевидно, все это причины организационного характера, и они безусловно оказывают существенное влияние на качественные и количественные показатели деятельности промышленного предприятия, на экономику производства.

Для решения возникающих проблем в аналитическом контроле промышленным регламентом предусматриваются «резервные» методики, разработанные на этапе лабораторного регламента. Эти методики приводятся в разделе «Контроль производства» с пометкой «по требованию». Такие анализы проводятся эпизодически, и они требуют большой затраты труда. Здесь важно подчеркнуть, что методики всех технологических регламентов должны сопровождаться подробными пояснительными записками, способствующими быстрому решению возникающих проблем.

Таким образом, в соответствии с разделением функций аналитического контроля, предписываемых технологическими регламентами для последовательных производственных этапов, можно выделить следующие аналитические методики:

лабораторные — содержат экспериментальный материал, обосновывающий выбор метода анализа, характеристики и области применения методик при исследованиях;

опытно-промышленные — преобразованные из лабораторных методик применительно к условиям производственного аналитического контроля с учетом используемых приборов, экспрессности и способов выражения результатов;

промышленные — использующие стандартную серийную аппаратуру, приборы, стандартные реактивы и обеспечивающие минимально необходимую информацию для управления технологическими процессами.

Метрологическое обеспечение контроля качества синтетических лекарственных средств. Необходимость метрологического обеспечения измерений в контроле качества лекарственных средств не вызывает сомнений. Совершенствование аналитических методик и повышение точности измерений способствует стабилизации технологических процессов и улучшению качества выпускаемой продукции. Для аналитического контроля метрологическое обеспечение выражается в аттестации разрабатываемых и применяемых методик анализа. По общепринятым и узаконенным требованиям аттестации подлежат все методики анализа по весьма обширной и трудоемкой программе. Из изложенного следует, что к методикам анализа, соответствующим отдельным этапам технологического регламента, предъявляются различные требования, определяющие степень метрологического обеспечения.

На стадии разработки лабораторного регламента полная аттестация методик постадийного аналитического контроля нецелесообразна и, более того, невозможна по следующим причинам: лабораторный анализ смесей (реакционных масс, некоторых промежуточных продуктов) показывает широкую вариабельность, зачастую непредсказуемую, их состава;

практически невозможно (и экономически нецелесообразно) составлять и характеризовать стандартные смеси для аттестации;

при анализе полупродуктов, реакционных масс величины погрешностей в пределах схемы синтеза не имеют принципиального значения, так как они нивелируются аналогичными погрешностями других (последующих) стадий и не влияют на выход целевого продукта (в расчете на исходное сырье).

Полной аттестации подлежат только те методики, по результатам выполнения которых проводятся технико-экономические расчеты всего производства, и методики, которые должны удовлетворять общим требованиям к выходной нормативной документации (фармакопейные статьи, ГОСТ и т. п.). На уровне лабораторного регламента рекомендуется проводить начальную аттестацию методик анализа исходного сырья и целевой продукции.

При подготовке опытно-промышленного регламента методики анализа промежуточных продуктов, отдельных реакционных смесей частично аттестуются по стандартным смесям (образцам), предоставляемым разработчиками технологии, и затем вносятся в технологический регламент для утверждения. На этом же этапе проводится аттестация методик на сырье, конечный продукт, стандартные смеси и регистрируемые отходы. На основании этих методик составляются и утверждаются стандарты предприятия и отдельные производственные рабочие инструкции.

Как следует из приведенной общей схемы аналитического контроля, в любом технологическом регламенте предусматривается регенерация отходов, которые могут возвращаться в рецикл. В основном это касается растворителей, которые после регенерации должны подвергаться аналитическому контролю по аттестованным методикам и/или в соответствии с требованиями действующей нормативной документации (ТУ, ГОСТ и т. п.).

К регенерируемым твердым отходам в химико-фармацевтической промышленности можно отнести сорбенты и ионообменники промышленных хроматографических колонн (например, в производстве L-аминокислот медицинского и пищевого назначения, пептидов фармакопейной чистоты) и других препаратов, требующих препаративной хроматографической очистки.

Внутризаводской аттестации подлежит ряд аналитических методик, предназначенных для промышленной санитарной службы предприятий, которая, наряду с общими нормативными документами по охране окружающей среды, должна иметь специальные методики для аналитического контроля отходов конкретного производства.

В промышленном регламенте указывается откорректированная погрешность аттестованных методик анализа. Для этого в аттестат на методику вводится значение межзаводской погрешности, которую определяют при испытаниях на воспроизведение методик анализа с использованием стандартных образцов в организациях, производящих, потребляющих и контролирующих данную продукцию.

При значении межзаводской погрешности, превышающей допустимую величину, методика усовершенствуется или разрабатывается вновь. Такой подход к составлению нормативной документации снимает в дальнейшем недоразумения, связанные с характеристикой качества выпускаемой продукции.

Стандартные образцы. Одной из задач прикладной метрологии в химическом анализе является разработка стандартных образцов. В постадийном аналитическом контроле в процессе производства, и особенно в контроле качества готовых лекарственных средств, стандартным образцам придается весьма важное значение. Проблема стандартных образцов возникает уже на начальных этапах разработки лекарственного средства.

По требованию химиков-аналитиков разработчики схемы синтеза предоставляют стандартные образцы соединений, охарактеризованные и идентифицированные химическими, физико-химическими и другими методами, включая методы микроанализа, титриметрию, хроматографию, ЯМР-спектроскопию, УФ-, ИК-спектрометрию, полярографию. Для оценки биологической активности лекарственных субстанций, а также для количественного определения действующего вещества используются биологические и ферментативные методы.

В отдельных случаях требуется стандартизованная смесь соединений, например оптических или структурных изомеров, или искусственно составленные смеси отдельных веществ. Этот вид стандартных образцов не требует строгой аттестации по общим нормативным требованиям.

Особую группу стандартных образцов составляют государственные стандартные образцы (ГСО), которые используются для контроля качества лекарств, как субстанций, так и готовых лекарственных форм. Требования к государственным стандартным образцам для контроля лекарственных средств и порядок их разработки и применения регламентируют нормативные документы: проект общей фармакопейной статьи «Государственные стандартные образцы лекарственных веществ», «Положения о государственных стандартных образцах лекарственных веществ», «Общие рекомендации по разработке, производству и распределению государственных стандартных образцов (ГСО) лекарственных веществ».

В этих документах перечислены все разделы (показатели и нормы качества) фармакопейной статьи на государственные стандартные образцы в зависимости от природы вещества, технологии его получения и области применения ГСО. В них также определены общие подходы к оценке качества самих государственных стандартных образцов, химические и физические методы, используемые для этой оценки.

Например, для установления подлинности ГСО рекомендуются ИК-спектроскопия, ЯМР, масс-спектрометрия и рентгеновская дифракционная кристаллография в сравнении с аналогичным стандартным образцом другой фармакопеи. В случае отсутствия последнего используется комплекс аналитических методов, обычно применяемых для характеристики нового соединения: элементный анализ, кристаллографические исследования, анализ функциональных групп, ИК- и УФ-спектрометрия, ЯМР-спектроскопия, масс-спектрометрия.

При оценке чистоты ГСО учитывается его назначение. Используемые в этом случае аналитические методы можно разделить на три группы:

методы, требующие сравнения с внешним стандартом (хроматографические, капиллярный электрофорез);

методы, основанные на измерении термодинамических свойств вещества (дифференциальная сканирующая калориметрия, анализ фазовой растворимости);

другие методы (определение воды и летучих веществ, титриметрия, поляриметрия, определение степени чистоты ГСО по их растворимости и т. д.).

Формирование качества и количества лекарственных препаратов зависит в значительной мере от сырья (субстанции). Субстанции, получаемые из минеральных или синтетических компонентов, обладают в основном более стабильными свойствами и более благополучны по санитарно-эпидемиологическим показателям, чем сырье, получаемое от биологических источников.

Действующие вещества биологического сырья постепенно накапливаются в живых организмах в ходе сложных обменных процессов. На их формирование оказывают огромное влияние состояние окружающей среды, условия жизни, отсутствие болезней. Поэтому биологические предшественники лекарственных средств являются предметом особого внимания ветеринарных специалистов.

РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ

Изучением растений, используемых в качестве растительного сырья для производства лекарственных средств, занимается наука фармакогнозия.

Термин происходит от греческих слов pharmakon — лекарство и gnosis — знания. Как наука развивается с середины XIX в.

Лекарственное растительное сырье (ангро) — это высушенные, реже свежеобработанные части лекарственных растений, используемые для получения лекарственных средств.

Биологически активные вещества (БАВ) — это соединения различной химической структуры, содержащиеся в лекарственных растениях и определяющие основной терапевтический эффект.

В лекарственном сырье наряду с действующими веществами содержатся и так называемые сопутствующие вещества, которые также могут обладать фармакологической активностью. Довольно часто сопутствующие вещества влияют на действие БАВ, потенцируя или ингибируя их фармакологический эффект.

Химический состав лекарственных растений. Лекарственные растения — сложные по своему химическому составу организмы. Любое растение представляет собой сложную лабораторию, в которой из углекислого газа, воды и неорганических веществ синтезируется огромное количество различных соединений. Растения являются единственными в природе организмами, способными синтезировать из неорганических веществ органические, необходимые для жизнедеятельности человека и животных. Другие живые организмы этим свойством не обладают.

Растения на 70. 90 % состоят из воды. Вода является основной внутриклеточной и внеклеточной средой, в которой протекают все биохимические процессы. Одновременно она является активным участником этих процессов и одним из источников образования органических веществ. Для лекарственного растительного сырья (J1PC) присутствие воды нежелательно. Она является хорошей средой для развития микроорганизмов, в воде легко проходит гидролиз биологически активных веществ. В связи с этим свежесобранные растения и их части в научной медицине используют очень ограниченно. Согласно Государственному реестру лекарственных средств (1998 г.) в свежем виде используют следующие виды сырья:

1. Аконита джунгарского трава свежая.

2. Алоэ древовидного лист свежий.

3. Алоэ древовидного побег свежий.

4. Аронии черноплодной плод свежий.

5. Безвременника великолепного клубнелуковица свежая.

6. Валерианы корневища с корнями свежие.

7. Желтушника раскидистого трава свежая.

8. Каланхоэ масса зеленая свежая.

9. Копытня европейского лист свежий.

10. Лаконоса (фитолакки) американского корни свежие.

11. Лук репчатый свежий.

12. Мимозы стыдливой лист свежий.

13. Облепихи плод свежий.

14. Омелы белой лист свежий.

15. Очитка большого трава свежая.

16. Переступня (брионии) белого корень свежий.

17. Подорожника блошного трава свежая.

18. Подорожника большого лист свежий.

19. Руты душистой трава свежая.

20. Токсикодендрона лист свежий.

21. Чеснок свежий.

22. Эвкалипта побеги свежие.

23. Эхинацеи пурпурной корневище с корнями свежее.

После заготовки такое сырье сразу же поступает на переработку. Получают из свежего сырья в основном соки или настойки. Большинство видов Л PC после сбора консервируют. Основной способ консервации сырья — сушка. Содержание влаги в воздушно-сухом сырье составляет 8. 16%. Согласно Государственному реестру в высушенном виде используют около 250 видов ЛРС. Растения помимо воды состоят из неорганических и органических веществ.

На долю неорганических (минеральных) веществ приходится от 3 до 25 % массы сухого остатка растений. Минеральные вещества (зола) остаются после сжигания органической части растений. Растения содержат практически все природные элементы, причем концентрация их в растениях близка к содержанию их в почве. Каждый минеральный элемент играет определенную роль в обмене веществ и не может быть заменен другим элементом. Минеральные элементы влияют практически на все физиологические процессы, происходящие в растениях: дыхание, рост, развитие, фотосинтез и т. д.

Неорганические вещества часто содержатся в растениях в виде комплексов с органическими соединениями. Например, кремниевая кислота в траве хвоща полевого находится в связанной с органическими соединениями растворимой форме. Слоевища ламинарии содержат органически связанный йод. Некоторые минеральные вещества непосредственно включены в структуру органических соединений (например, магний входит в состав хлорофилла). По количественному содержанию в растениях различают макро- и микроэлементы.

К макроэлементам относятся металлы — калий (К), кальций (Са), магний (Mg), натрий (Na) и неметаллы — кремний (Si), сера (S), фосфор (Р), хлор (С1). Содержание их не менее 0,01%. Некоторые из макроэлементов участвуют в фармакологическом эффекте лекарственного растительного сырья. Например, кремнеорганические соединения хвоща полевого и горца птичьего в почках и мочевыводящих путях больного образуют защитные коллоиды, которые препятствуют кристаллизации некоторых минеральных компонентов, затрудняют образование мочевых камней.

К микроэлементам относятся железо (Fe), медь (Си), марганец (Мn), кобальт (Со), цинк (Zn), алюминий (Аl), молибден (Мо), хром (Сг), золото (Аu), ртуть (Hg), свинец (Рb), серебро (Ag), йод (J), бор (В) и др. Содержание их незначительное и обычно не превышает 0,001 %.

Отдельные микроэлементы также определяют фармакологическую активность лекарственного растительного сырья. Например:

слоевища ламинарии (бурые водоросли накапливают йод) используют при лечении больных с заболеваниями щитовидной железы;

сфагнум (он концентрирует Ag) применяют для лечения ран;

сырье крапивы, тысячелистника, зайцегуба опьяняющего, богатое Са и Mg, используют при лечении больных с внутренними кровотечениями;

побеги черники, богатые Мn и Аl, применяют при лечении больных сахарным диабетом.

Неорганические вещества растений как лекарственное средство в научной медицине не используются, но применяются в народной медицине.

Основную массу сухого остатка растений составляют органические вещества. Среди них различают вещества первичного синтеза и вещества вторичного синтеза.

Вещества первичного синтеза образуются в процессе ассимиляции, т. е. превращения веществ, поступающих в организм извне, в вещества самого организма (протопласт клеток, запасные вещества и т.д.). К веществам первичного синтеза относят аминокислоты, белки, липиды, углеводы, ферменты, витамины и органические кислоты.

Липиды (жиры), углеводы (полисахариды) и витамины широко используются в медицинской практике. Аминокислоты делят на протеиногенные (входят в состав белков — их около 20) и непротеиногенные (встречаются в растениях в свободном виде — их около 200). Особое место среди аминокислот занимают восемь незаменимых аминокислот (триптофан, фенилаланин, лизин, треонин, валин, лейцин, изолейцин и метионин). Они необходимы для поддержания жизни животных и человека и поступают в их организм только из растений. Белки наряду с липидами и углеводами составляют структуру клеток и тканей растительного организма, участвуют в процессах биосинтеза, являются эффективным энергетическим материалом.

Белки и аминокислоты лекарственных растений оказывают неспецифическое благоприятное действие на больной организм. Они влияют на синтез белков, создают условия для усиленного синтеза иммунных тел, что приводит к повышению защитных сил организма. Улучшенный синтез белков включает также и усиленный синтез ферментов, вследствие чего улучшается обмен веществ. Биогенные амины и аминокислоты играют важную роль в нормализации нервных процессов.

Ферменты занимают особое место среди белков. Роль ферментов в растениях специфична — они являются катализаторами большинства химических реакций. Все ферменты делятся на два класса: однокомпонентные и двухкомпонентные. Однокомпонентные ферменты состоят только из белка, двухкомпонентные — из белка (апофермента) и небелковой части (кофермента). Коферментами могут быть витамины.

Органические кислоты наряду с углеводами и белками являются самыми распространенными веществами в растениях. Они принимают участие в дыхании растений, биосинтезе белков, жиров и других веществ. Органические кислоты относятся к веществам как первичного синтеза (яблочная, уксусная, щавелевая, аскорбиновая), так и вторичного синтеза (урсоловая, олеаноловая).

Органические кислоты являются фармакологически активными веществами и участвуют в суммарном эффекте препаратов и лекарственных форм растений:

салициловая и урсоловая кислоты обладают противовоспалительным действием;

яблочная и янтарная кислоты — доноры энергетических групп, способствуют повышению физической и умственной работоспособности;

аскорбиновая кислота — витамин С.

Вещества вторичного синтеза образуются в растениях в результате диссимиляции. Диссимиляция — процесс распада веществ первичного синтеза до более простых веществ, сопровождающийся выделением энергии. Из этих простых веществ с затратой выделившейся энергии образуются вещества вторичного синтеза. Например, глюкоза (вещество первичного синтеза) распадается до уксусной кислоты, из которой синтезируется мевалоновая кислота и через ряд промежуточных продуктов — все терпены.

К веществам вторичного синтеза относятся терпены, гликозиды, фенольные соединения, алкалоиды. Все они участвуют в обмене веществ и выполняют определенные важные для растений функции. Каждая группа веществ растений не является изолированной и неразрывно связана с другими группами биохимическими процессами. Например:

большая часть фенольных соединений является гликозидами; горечи из класса терпенов являются гликозидами; растительные стероиды по происхождению являются терпенами, в то же время стероидные сапонины и стероидные алкалоиды являются гликозидами;

каротиноиды, производные тетратерпенов, являются витаминами;

моносахариды и олигосахариды входят в состав гликозидов. Вещества первичного синтеза содержат все растения, а вещества вторичного синтеза накапливают растения отдельных видов, родов, семейств.

К лекарственным растениям относят лишь те, которые избирательно накапливают биологически активные вещества с выраженной фармакологической активностью, действующие на организм человека и животных и используемые для заготовки лекарственного растительного сырья, применяемого с лечебными целями.

При применении растений в качестве лекарственных средств на организм животного действует сложный комплекс минеральных веществ и органических соединений первичного и вторичного синтеза. В этом комплексе различают биологически активные вещества и вещества, кажущиеся неактивными.

Биологически активные вещества растений обладают выраженной фармакологической активностью (их еще называют действующими веществами). К БАВ относятся как вещества первичного синтеза (витамины, липиды, углеводы), так и преимущественно вещества вторичного синтеза (эфирные масла, горечи, сердечные гликозиды, сапонины, алкалоиды, кумарины, хромоны, лигнаны, флавоноиды, дубильные вещества и т. д.).

Вещества, кажущиеся неактивными, условно делят на сопутствующие и балластные. Сопутствующие вещества могут быть полезными и вредными (нежелательными). Полезные сопутствующие вещества (витамины, органические кислоты, минеральные вещества, сахара и др.) оказывают благоприятное воздействие на организм. Некоторые из них могут влиять на эффективность проявления фармакотерапевтического действия БАВ. Например: сапонины из листьев наперстянки способствуют растворению и всасыванию сердечных гликозидов, ускоряя их действие;

растворимые или набухающие полисахариды, дубильные вещества способствуют пролонгированию лечебного эффекта БАВ.

Примерами нежелательных сопутствующих веществ могут служить:

производные антранола в свежесобранной коре крушины, обладающие выраженным рвотным действием; смолистые вещества в листьях сенны.

Сухой остаток (10. 30 %)

Микроэлементы ( лов. Они кумулируются в почве и растениях. При применении загрязненного лекарственного растительного сырья металлы-загрязнители попадают в организм человека или животного. При длительном воздействии в малых дозах (курс лечения с использованием ЛPC обычно составляет не менее 10 дней) меняются физиологические реакции и биохимические показатели живого организма. Это сказывается на общей реактивности организма — снижается его сопротивляемость к другим экзогенным воздействиям. При воздействии на организм больших доз металлов-загрязнителей развивается неспецифическая патология или заболевание химической природы. Например:

алюминий (Аl) вызывает нарушения минерального обмена веществ, функций нервной системы, обладает мутагенной активностью;

медь (Сu) вызывает острые отравления, имеющие широкий спектр действия с многообразными клиническими проявлениями, обладает высокой гепатотоксичностью, вызывает гемолиз эритроцитов;

никель (Ni) оказывает общетоксическое действие, вызывает головную боль, одышку, понижение аппетита, вегетативные расстройства с артериальной гипотонией, гипо- и анацидные гастриты, изменения со стороны сердечной деятельности, заболевания легких, злокачественные новообразования, аллергию;

свинец (Рb) вызывает поражения периферической нервной системы, костного мозга, крови, сосудов, генетического аппарата и другие токсические эффекты.

Металлы-загрязнители влияют и на сами растения. Тот же свинец снижает содержание флавоноидов в цветках липы, сульфаты и сульфиды различных металлов снижают выделение фитонцидов.

Основными источниками загрязнения окружающей среды металлами являются автомобильный транспорт, различные промышленные предприятия.

Лекарственные растения, произрастающие в непосредственной близости к автомобильным дорогам (до пяти метров), имеют высокую концентрацию БАП и металлов (максимальная концентрация — на расстоянии одного метра от дороги). Но газопылевая струя автомобильного транспорта выбрасывается невысоко над почвой, и дальность рассеивания выхлопных газов, включающих аэрозоли металлов, сажи, ПАУ и других веществ, не превышает 100 м от магистрали.

Концентрация этих веществ в растениях зависит и от интенсивности движения автомобильного транспорта. В сельской местности высокое содержание (выше фонового) БАП и металлов в лекарственных растениях ограничивается зоной 100 м от обочины дороги. В городе такую зону выделить невозможно из-за плотности уличной сети и огромного количества других источников загрязнения окружающей среды.

Сходная картина наблюдается и в зоне деятельности промышленного предприятия. Содержание веществ-загрязнителей в почве и лекарственных растениях зависит от высоты заводских труб и от расстояния до источника загрязнения. Вокруг предприятия отмечаются следующие зоны:

в полосе шириной 0,5. 1 км — зона выпадения наиболее крупных и тяжелых частиц;

на расстоянии 1,5. 2,5 км — зона максимального и разнообразного загрязнения выбросами;

на расстоянии 2,5. 5 км — зона выбросов более тонкого гранулометрического состава;

на расстоянии 5. 10 км —зона газопылевых выбросов с меньшей плотностью покрытия.

Нитраты. В сельскохозяйственном производстве широко используются азотные удобрения, которые повышают урожайность в два-три раза. Вместе с тем интенсивное использование азотных удобрений приводит к повышенному содержанию нитратов в продуктах растениеводства, а также в растительности, произрастающей вблизи сельскохозяйственных угодий. Это касается и дикорастущих лекарственных растений, особенно сорных и рудеральных, произрастающих вблизи полей. Особенно много нитратов накапливают растения семейства сельдерейных, капустных.

В организме растений, животных и человека нитраты восстанавливаются до нитритов, которые более чем в 10 раз токсичнее нитратов. Нитриты при взаимодействии с аминами в желудочно-кишечном тракте превращаются в нитрозамины, вызывающие метгемоглобинемию, обладающие тератогенным, иммунодепрессивным и канцерогенным действием.

Допустимое суточное потребление нитратов с пищей и водой не должно превышать 1 мг/кг массы тела; 8. 15 г нитратов могут быть для человека смертельной дозой. Степень перехода нитратов из ЛPC в водные настои и отвары составляет от 63 до 72 %.

Накопление нитратов строго специфично для каждого вида растений. Например, подорожник большой и крапива двудомная накапливают больше нитратов, являясь нитратофилами. Растения, произрастающие на более плодородных почвах, содержат больше нитратов.

Максимальное загрязнение лекарственных растений нитратами происходит на сельскохозяйственных полях, куда вносятся минеральные удобрения, и в непосредственной близости от них (5. 10 м). С увеличением расстояния от полей степень загрязнения растений падает. Лекарственное растительное сырье, безопасное в отношении нитратов, можно заготавливать не ближе 10 м от источника загрязнения.

Гербициды и пестициды. Воздействию гербицидов и пестицидов наиболее подвержены сорные и рудеральные растения, произрастающие вблизи сельскохозяйственных угодий, ферм. Особенности воздействия на организм, определения и нормирования содержания гербицидов и пестицидов в лекарственных растениях в нашей стране мало изучены.

Радионуклиды. Наиболее опасным источником загрязнения объектов окружающей среды, в том числе и дикорастущих лекарственных растений, являются радионуклиды (PH). Основную опасность из них представляют те, которые попали в природную среду в результате экологических катастроф, аварий, подобных Чернобыльской. Среди них особенно опасны PH с длительным периодом полураспада (например, цезий-137, период полураспада составляет 30 лет).

В растения PH поступают воздушным и почвенным путем. Величина задерживания их на растениях и проникновение в ткани растений зависит от многих факторов (биомассы, листовой поверхности и т. д.). Большое значение имеет вторичное аэральное загрязнение (перенос ветром радиоактивной пыли). Плоды древесных растений на открытых местах обитания практически не накапливают цезий-137 и стронций-90.

Переход PH из растительного сырья в лекарственную форму колеблется от 24 до 78 %. Временно допустимый уровень (ВДУ) цезия-137 в лекарственных формах из растительного сырья составляет 1,5 * 10 -8 ки/кг, л.

Поступая в организм человека, PH накапливаются в мышцах (цезий-137) и костной ткани (стронций-90), создавая тем самым очаги постоянного облучения, что может привести к возникновению лучевой болезни с различными формами ее проявления.

Следует отметить, что токсичные агенты накапливаются в растениях в значительно больших количествах при совместном воздействии. Например, содержание свинца в придорожных растениях под воздействием ионизирующего излучения увеличивается в 50 раз. Во многих районах, подвергшихся радиоактивному загрязнению, наблюдается многократное превышение ПДК по нитратам. Опасных уровней достигает также концентрация в окружающей среде различных пестицидов. Это создает реальную угрозу синергизма при воздействии на организм человека ионизирующих излучений и химических факторов загрязнения окружающей среды.

Растения — концентраторы токсических веществ. Наибольшее накопление веществ-загрязнителей происходит в растениях с крупными листьями, с листьями в прикорневой розетке, с опушенными листьями, образующих густые заросли.

Концентраторами токсических веществ являются земляника, крапива, мать-и-мачеха, пижма, подорожник, полынь, пустырник, тысячелистник.

Современный период характеризуется резким загрязнением окружающей среды мутагенами. Они ускоряют старение человека, увеличивают заболеваемость, смертность, снижают продолжительность жизни. Прямое или потенциальное мутагенное действие выявлено у подорожника большого, калины обыкновенной, колючника Биберштейна, дымянки аптечной. Некоторые растения являются антимутагенами. Они способны нейтрализовать действие прямых и потенциальных мутагенов. Это душица, зверобой, мать-и-мачеха, пижма, чистотел, шиповник.

Эндоэкологическое действие растений. Необходимо заготавливать только экологически чистое лекарственное растительное сырье. При отсутствии в НД норм допустимого и безопасного содержания вредных веществ при заготовке JIPC необходимо соблюдать определенные правила. Нельзя собирать лекарственные растения, если:

они резко отличаются от обычных растений размерами (гигантизм, карликовость);

есть явные признаки изменения обычной формы и окраски;

есть необычные наросты, пятна, другие образования;

имеется слой пыли или других твердых и жидких отложений;

видны признаки загрязненности почвы (минеральные удобрения, горючие и смазочные материалы и др.);

растения произрастают вблизи источников загрязнения, в черте городов и других крупных населенных пунктов;

есть сведения об обработке растений гербицидами, пестицидами и другими ядохимикатами;

есть сведения о выпадении радиоактивных осадков, наличии хранилищ радиоактивных отходов.

Экологически чистое лекарственное растительное сырье может использоваться не только для лечения различных заболеваний, но и в борьбе с последствиями экологических бедствий. Установлено, что основная часть токсинов при экологическом загрязнении переходит из крови в межклеточное, а затем и внутриклеточное пространство органов и тканей животных. Если вызываемые ими изменения не приняли еще необратимого характера, могут помочь некоторые лекарственные растения, обладающие эндоэкологическим действием. Они способствуют вымыванию токсинов из межклеточного, а некоторые и из внутриклеточного пространства. Например:

настой из молодых листьев мать-и-мачехи улучшает лимфатический дренаж почек, при этом заметно ускоряется выведение из почечной ткани посторонних веществ в лимфатические капилляры. В результате детоксикации улучшаются процессы обмена веществ в почках;

настой из листьев смородины способствует промыванию внеклеточного вещества и вымыванию из него токсинов клеточного происхождения, проникших туда извне. Особенно активное очистительное действие паста из листьев смородины оказывает на печень, миокард, стенки артериальных сосудов и, что особенно важно, на лимфатические узлы. При этом улучшается барьерная функция лимфатических узлов, повышается их способность задерживать и нейтрализовать попадающие в них с лимфой токсичные вещества. Подобным действием обладают и плоды шиповника;

настой травы хвоща полевого способствует выведению из организма свинца, стронция и кадмия.

Эндоэкологическое действие выражено также у листьев брусники, подорожника большого, кукурузных рылец, корней петрушки.

Показатели качества лекарственных средств растительного происхождения. В Государственный реестр включено около 250 наименований лекарственного растительного сырья и около 600 препаратов растительного происхождения. Поэтому оценка качества лекарственного растительного сырья, т. е. установление возможности применения его как лекарственного средства (лекарства), является одной из задач специалиста-провизора. Определяют подлинность и доброкачественность лекарственного растительного сырья, т. е. соответствие тем требованиям, которые предъявляет к сырью нормативный документ.

Одним из важных показателей качества лекарственного растительного сырья является содержание основных биологически активных веществ. Их определение проводится с помощью химических и физико-химических методов анализа, основанных на физических, химических и биологических свойствах БАВ.

Физические свойства БАВ. По агрегатному состоянию эфирные масла, жирные масла и бескислородные алкалоиды представляют собой жидкости.

Эфирные масла — летучие жидкости, представляющие собой смеси органических веществ различной природы, вырабатываемые растениями и обусловливающие их запах.

Жирные масла — нелетучие сложные органические вещества растительного и животного происхождения, представляющие собой смеси различных глицеридов.

По цвету эфирные и жирные масла — чаще всего бесцветные или желтоватые. Эфирные масла могут быть и окрашенными: например, красного цвета — масло тимьяна, синего — от присутствия азуленов. Жирные масла при нагревании оставляют жирное пятно на бумаге, эфирные — испаряются без остатка.

Запах масел, особенно эфирных, ароматный, характерный, плотность колеблется от 0,8 до 1,19 г/см 3 , но большей частью меньше единицы.

Бескислородные алкалоиды (анабазин, конинн, пахикарпин, никотин) представляют собой жидкости с неприятным запахом.

Все указанные жидкости нерастворимы в воде, но хорошо растворяются в спиртах, жирах, неполярных органических растворителях (хлороформе, диэтиловом и петролейном эфирах), обладают оптической активностью, масла способны к рефракции.

При охлаждении, а иногда при комнатной температуре, эфирные масла застывают в кристаллическую массу — стеароптен, оставшаяся жидкая часть называется элеоптеном.

К твердым кристаллическим или аморфным веществам относятся: горечи, гомогликозиды, сердечные гликозиды, сапонины, простые фенольные соединения, кумарины, хромоны, лигнаны, флавоноиды, антраценпроизводные, дубильные вещества, кислородсодержащие алкалоиды, водорастворимые витамины.

Бесцветные или слегка желтоватого цвета — горечи (монотерпеноидные иридоиды), гомогликозиды, сердечные гликозиды, сапонины, простые фенольные соединения, кумарины, хромоны, лигнаны, флавоноиды группы флавана, аскорбиновая кислота, большинство кислородсодержащих алкалоидов.

Флавоноиды, производные флавонов, витамин К —желтого цвета; халконы, ауроны и каротиноиды — оранжевого; антоцианы — красного или синего в зависимости от реакции среды (кислая или щелочная); антраценпроизводные — желтого, оранжевого или красного; дубильные вещества — желтого или желто-бурого.

Большинство БАВ без запаха, горького вкуса; гомогликозиды без запаха и вкуса; дубильные вещества — вяжущего вкуса; аскорбиновая кислота — кислого.

В растениях БАВ встречаются в виде гликозидов и агликонов. К ним относятся: иридоиды, гомогликозиды, сердечные гликозиды, сапонины, простые фенольные соединения, кумарины, хромоны, лигнаны, флавоноиды, антраценпроизводные, дубильные вещества.

Гликозиды растворимы в воде и водных растворах низших спиртов (метиловом и этиловом) и плохо растворимы в органических растворителях (бензоле, эфире, хлороформе). Полисахариды хорошо растворяются в воде, но не растворяются в 95%-ном этиловом спирте. Гидрофильные сердечные гликозиды хорошо растворяются в воде, плохо — в липидах, липофильные — легко растворяются в липидах, плохо — в воде.

Агликоны нерастворимы в воде, но хорошо растворимы в неполярных органических растворителях (эфире, хлороформе), спиртах, ацетоне.

Катехины и лейкоантоцианидины растворимы в воде, спиртах и ацетоне, плохо растворяются в других органических растворителях.

Дубильные вещества хорошо растворяются в воде с образованием коллоидных растворов, растворимы также в этиловом и метиловом спирте, ацетоне, этилацетате, бутаноле, пиридине, нерастворимы в хлороформе, бензоле, диэтиловом эфире и других неполярных растворителях.

Алкалоиды в растениях встречаются в виде солей и оснований. Алкалоиды-соли хорошо растворимы в воде и этиловом спирте (особенно в разбавленном), плохо или совсем нерастворимы в органических растворителях (хлороформе, этиловом эфире, дихлорэтане и др.). Исключения составляют: хинина сульфат плохо растворяется в воде, скополамина гидробромид растворяется в хлороформе.

Алкалоиды-основания обычно плохо растворяются в воде, но легко растворяются в органических растворителях. Исключения: цитизин, кофеин, кодеин хорошо растворяются и в воде, и в органических растворителях.

Все гликозиды и алкалоиды оптически активны.

Возгоняются при высокой температуре: кумарины, антраценпроизводные, отдельные алкалоиды (кофеин, никотин).

Флуоресцируют в УФ-свете:

сердечные гликозиды — оттенками желтого, зеленого и голубого цветов;

простые фенолы, кумарины — голубым, синим, фиолетовым, зеленым и желтым цветами;

большинство хромонов и лигнанов — желтым или желто-зеленым цветами;

флавоны, флавонол-3-гликозиды, флавононы, халконы — коричневым цветом;

флавонолы и их 7-гликозиды — желтым или желто-зеленым цветами;

ксантоны — оранжевым цветом;

катехины — голубым цветом;

антраценпроизводные — розовым, красным, оранжевым, желтым цветами;

алкалоиды цитизин — фиолетовым, берберин — желто-зеленым цветами;

витамин K₁ — красным цветом, но под действием УФ-лучей быстро разрушается и становится зеленого цвета.

Специфическим свойством сапонинов является их способность снижать поверхностное натяжение жидкостей (воды) и давать при встряхивании стойкую обильную пену. Такая поверхностная активность связана с наличием в молекулах сапонинов одновременно как гидрофильного, так и липофильного остатков.

Химические свойства БАВ. Химические свойства гликозидов многообразны и обусловлены наличием гликозидной связи и строением сахаров и агликона.

Под действием ферментов при наличии воды гликозиды гидролизуются. Возможен гидролиз не только ферментативный, но и кислотный, и щелочной. Оптимальной для ферментативного гидролиза является температура 30. 50°С, при температуре свыше 50 °С ферменты денатурируют.

Химические свойства сердечных гликозидов обусловлены наличием стероидного ядра, лактонного кольца, углеводной цепи и присутствием гликозидной связи.

Самыми нестойкими в молекулах сердечных гликозидов являются лактонное кольцо и гликозидная связь.

В случае, если на конце углеводной цепи находятся глюкоза или рамноза, сердечные гликозиды легко обрывают конечную молекулу моносахарида и образуют вторичные гликозиды.

Реакции на стероидную структуру основаны на способности стероидного ядра сердечных гликозидов (кардиостероидов) и стероидных сапонинов подвергаться дегидратации под действием кислотных реагентов (уксусный ангидрид, концентрированная серная кислота, трихлоруксусная кислота и др.) с образованием окрашенных комплексных соединений (реакция Либермана— Бурхарда).

Реакции на ненасыщенное лактонное кольцо сердечных гликозидов основаны на способности ненасыщенного лактонного кольца легко окисляться полинитросоединениями (нитропруссидом натрия, пикриновой кислотой) в щелочной среде с образованием окрашенных в желтый или красный цвет продуктов реакции.

Реакции на углеводную часть молекулы гликозида основаны на способности моносахаридов углеводной цепи образовывать окрашенные комплексы с различными реактивами. Моносахара, входящие в состав гликозида, вступают во все цветные реакции, свойственные углеводам Феллинга, серебряного зеркала и др.

Фенольные гликозиды дают:

растворимые в воде феноляты с гидроксидом натрия (флавоноиды и кумарины — желтого цвета, антрагликозиды — вишневокрасного цвета);

окрашенные комплексные соли с хлоридом окисного железа или железоаммонийными квасцами — от зеленой до фиолетовой окраски (простые фенолы, кумарины, лигнаны, флавоноиды, дубильные вещества), хлоридом алюминия — желтой окраски с желто-зеленой флуоресценцией (флавоноиды);

реакцию азосочетания с солями диазония с образованием азокрасителя в зависимости от структуры от желтого до вишнево-красного цветов.

Флавоноиды способны восстанавливаться (проба Синода), простые фенольные соединения (гидрохинон) — окисляться раствором йода.

Дубильные вещества легко окисляются кислородом воздуха, перманганатом калия и другими окислителями. Они способны образовывать прочные межмолекулярные связи с белками и другими полимерами (пектиновыми веществами, целлюлозой и др.), легко адсорбироваться на кожном порошке, целлюлозе, клетчатке. Из водных растворов дубильные вещества осаждаются желатином, алкалоидами, основным ацетатом свинца, бихроматом калия, сердечными гликозидами.

Алкалоиды образуют нерастворимые (или слаборастворимые) осадки с комплексными йодидами металлов, высокомолекулярными неорганическими кислотами, высокомолекулярными органическими веществами кислого характера (общеалкалоидные, осадочные реакции).

Алкалоиды вступают в реакции, зависящие от наличия в их молекулах различных функциональных групп. Например, морфин содержит фенольный гидроксил, поэтому он со щелочами образует феноляты; дает реакции с хлоридом окисного железа и другими реактивами.

Биологические свойства БАВ. Сердечные гликозиды способны вызывать в токсических дозах остановку сердца животных в стадии систолы. В качестве подопытных животных используют лягушек, голубей или кошек. Чувствительность животных к сердечным гликозидам определяют в сравнении со стандартными индивидуальными веществами или экстрактами, которые вырабатывают в научно-исследовательских институтах.

Сапонины в виде гликозидов токсичны для холоднокровных (рыб, лягушек, круглых червей). Они нарушают функцию жабр, которые являются не только органом дыхания, но и регулятором солевого осмотического давления в организме. Сапонины парализуют или вызывают гибель холоднокровных даже в больших разведениях (1:1 000 000). Также они обладают гемолитической активностью, т. е. способны растворять липидную часть оболочки эритроцитов. В результате этого оболочка из полупроницаемой становится проницаемой, гемоглобин свободно поступает в плазму крови и растворяется в ней. Образуется красный прозрачный раствор — «лаковая кровь».

В связи с этим сапонины не применяются для внутривенного введения, так как вызывают анемию. При приеме внутрь, после гидролиза в желудочно-кишечном тракте до агликонов, сапонины теряют гемолитическую активность. Все указанные выше свойства биологически активных веществ используются при анализе лекарственного растительного сырья.

ОРГАНОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ (ОРГАНОПРЕПАРАТЫ)

Это лекарственные средства, вырабатываемые из органов и тканей убойных животных. В последние годы они приобретают в медицинской и ветеринарной практике все большее значение из-за высокой эффективности, которая обусловлена наличием гормонов и ферментов, а также общетерапевтическим действием.

Применение препаратов зоотехнии позволяет регулировать процессы размножения сельскохозяйственных животных. Благодаря воздействию вводимых гормональных препаратов на обменные процессы организма можно получать максимальный выход наиболее важных видов сельскохозяйственной продукции.

На протяжении веков животные обеспечивали человека продуктами питания и ценными непищевыми продуктами, но лишь сравнительно недавно ученые узнали, что биологически активные вещества, выделенные из органов и тканей животных, представляют ценность для медицины и ветеринарии. Путем экстракции и очищения этих веществ современная фармацевтика изготовляет большое число медицинских и ветеринарных препаратов. Для производства органопрепаратов из животного сырья должны выполняться следующие условия: такое сырье необходимо получать постоянно и в достаточном объеме, необходим надежный метод его консервирования.

В настоящее время производство синтетических гормонов и ферментов не может полностью удовлетворить потребности ветеринарии и медицины, поэтому сырье, полученное от убоя сельскохозяйственных животных, остается важным источником для фармацевтической промышленности. Гормоны и ферменты, полученные от животных различных видов, не обнаруживают видовой специфичности в биологическом воздействии на живой организм.

В нормативной и технической документации сырье, используемое для производства органопрепаратов, бывает эндокринным, ферментным и специальным. Ценность такого сырья как источника получения лечебных препаратов постоянно возрастает в результате научных исследований, открывающих в нем все новые и новые биологически активные вещества.

К эндокринному сырью относят железы внутренней (не имеющие выводных протоков и выделяющие секреты в лимфу) и смешанной (с двойной — внутренней и внешнесекреторной функцией) секреции.

К ферментному сырью относят железы внешней секреции, выделяющие секреты в полости организма.

Следует отметить, что такое деление является условным, так как четкую границу между эндокринным и ферментным сырьем провести нельзя. Некоторые железы имеют несколько функций в организме, могут выделять и гормоны, и ферменты (например, поджелудочная железа выделяет как гормоны — инсулин, липокаический гормон и др., так и ферменты — панкреатин, трипсин и др.).

Эндокринное и ферментное сырье включает следующие органы животных: гипофиз, шишковидную железу (эпифиз), кору головного мозга, сосуды, сердечную мышцу, кожу, гипоталамус, надпочечники, паращитовидные железы, щитовидную, поджелудочную, зобную железы, семенники, плаценту, яичники и желтое тело, слизистую оболочку свиных желудков и сычугов крупного рогатого скота, сычуги молочных телят и ягнят, слизистую оболочку тонких кишок и др.

К специальному сырью для выработки органотерапевтических препаратов относят самые разнообразные органы и ткани: печень, кровь, желчь, легкие, спинной и головной мозг, стекловидное тело глаз, эпителий языков (слизистую оболочку), эмбрионы убойных животных и кровяную сыворотку, половые железы, молочную железу крупного рогатого скота, хрящи, мышцы молодняка крупного рогатого скота, желатин из костей животных, тонкие кишки овец и др. от разных видов убойных животных.

На всех усовершенствованных мясных комбинатах имеются цехи специальных фабрикатов (эндокринные цехи), в которых и происходит обработка сырья, передаваемого сюда из убойно-разделочного цеха. В цехах специальных фабрикатов обычно производится очистка органов от оболочки и случайных прирезей окружающих органов и тканей, консервация или подготовка к консервации их в целях фиксации активно действующих веществ органа. Эндокринный цех должен отвечать следующим требованиям: размер цеха должен соответствовать объему обрабатываемого сырья и числу работающих;

иметь хорошее освещение, исключающее попадание на обрабатываемое сырье прямых солнечных лучей;

температура воздуха в помещении не должна превышать 18 °С;

препаровочные столы должны иметь покрытия из нержавеющей стали или другого материала, устойчивого к агрессивным средам, разрешенного к использованию на пищевых предприятиях;

стены помещения должны быть покрыты облицовочной плиткой, пластикатом или выкрашены масляной краской;

обеспечение горячим и холодным водоснабжением, канализацией, электроэнергией и приспособлениями для мойки инвентаря и инструментов, вентиляцией;

должны быть установлены скороморозильные шкафы, шкафы для хранения инструментов и реактивов, лабораторный автоклав для стерилизации инструментов.

Эндокринное, ферментное и специальное сырье отличается своей спецификой, которая предъявляет особые требования к его сбору, хранению и переработке. Особенность сырья объясняется неустойчивостью находящихся в нем белковых биологически активных веществ. После убоя в органах и тканях животных начинают развиваться автолитические и одновременно микробиальные процессы, которые приводят к порче желез и органов. От того, насколько своевременно предупреждаются эти процессы, зависит качество и выход готовой продукции при переработке сырья.

К специальным фабрикатам мясной промышленности относятся железы внутренней секреции и органы, служащие исходным материалом для выработки животных ферментов. К ним же относятся и иные продукты, являющиеся исходным материалом для выработки разного рода лекарственных веществ.

Биологически активные вещества, содержащиеся в железах внутренней секреции и ферментах, требуют весьма специфических условий для их сохранения; сроки хранения в целом ряде случаев очень невелики и не могут быть уложены в рамки времени, которое необходимо для транспортирования больших партий такого сырья на сравнительно большие расстояния. Это вынуждает искать производителей таких способов обработки эндокринного сырья и ферментов, при которых прочно, на продолжительный срок фиксировались бы имеющиеся в них ценные вещества. Данное требование относится в первую очередь к органам, биологически активные вещества которых подвергаются изменениям очень быстро после прекращения жизни животного и не могут сохраняться необходимое время в изолированном органе. Этим условиям должны быть подчинены как технологические процессы, так и место расположения цехов специальных фабрикатов на комбинатах.

Разновидности органопрепаратов обусловливаются многообразием тканевых структур, из которых они приготовлены. Препараты, приготовленные из определенного органа, могут эффективнее, чем другие, воздействовать (имеют тропность) на гомологичный (одноименный, похожий) орган пациента (примером может служить аллохол). За открытие механизма органотропизма как всеобъемлющего свойства живого американский биохимик Г. Блобель был удостоен в 1999 г. Нобелевской премии. То есть фармакологический лечебный эффект может развиваться только в тех органах и тканях, из которых препарат изготовлен. Органопрепараты не являются стимуляторами (такими, как, например, анаболические стероиды), не истощают клеточный резерв, они лишь способствуют восстановлению поврежденных в процессе жизнедеятельности клеточных структур.

Характеристика органопрепаратов, вырабатываемых из эндокринного, ферментного и специального сырья, и товароведные требования к ним. Органопрепараты отнесены ОКП к классу Медикаменты, химико-фармацевтическая продукция и продукция медицинского назначения (код 93 0000), подклассу Витамины, коферменты, ферменты, аминокислоты, органопрепараты (эндокринные препараты) (код 93 5000), они вырабатываются согласно ГОСТ, ГОСТ Р и ТУ.

Из эндокринного и ферментного сырья вырабатывают гормональные и ферментные препараты.

Гормональные препараты. Эндокринная система обладает коррелятивным действием и влияет на все функции организма. Из перечисленных желез внутренней, внешней и смешанной секреции наибольшее значение для получения гормональных препаратов используют гипофиз, эпифиз, поджелудочную и щитовидную железы, надпочечники, яичники и семенники.

Гипофиз (питуитарная железа, нижний придаток мозга) — округлой или эллипсоидной формы, расположен в полости черепа в углублении основной кости (турецком седле). Вырабатывает криотропные гормоны, действующие на другие эндокринные железы и специфически стимулирующие рост, дифференцировку и функциональную активность некоторых органов. Гормоны, продуцируемые отдельными участками (долями) гипофиза, отличаются как по характеру действия, так и по природе действующих начал.

В зависимости от вида скота используются гипофизы крупного рогатого скота (передняя и задняя доли), овец и коз, свиней.

Передняя доля гипофиза выделяет ряд гормонов, активизирующих эндокринные железы: тиреотропный (ТТГ), действующий на щитовидную железу; адренокортикотропный (АКТГ) — на кору надпочечников; фолликулостимулирующий (ФСГ) — на половые железы; лютеотропный (ЛТГ) — на молочные железы.

Наиболее важным является использование передней доли гипофиза для выработки АКТГ. Его содержание в гипофизах различных видов животных неодинаково. Наибольшее количество этого гормона содержится в свиных, а наименьшее в говяжьих гипофизах.

Помимо АКТГ из передней и средней долей гипофиза изготовляют такие гормональные препараты, как пролактин и соматотропин (лактогенный гормон и гормон роста), интермедии (применяется при лечении глазных болезней).

Задняя доля гипофиза продуцирует: окситоцин, применяемый в акушерской практике; вазопрессин, повышающий кровяное давление и обладающий антидиуретическим эффектом, и др. Гормоны задней доли гипофиза в качестве действующих начал входят в состав таких препаратов, как питуитрин, адиурекрин и маммафизин. Препарат, содержащий окситоцин, вызывает сокращение гладких мышц, тем самым повышается тонус беременной матки и сокращение мышечных волокон вокруг альвеол молочной железы, способствуя выделению молока.

Эпифиз (шишковидная железа, верхний придаток мозга) — грушевидной формы, расположен в полости черепа под полушариями головного мозга, у крупного рогатого скота имеет желтовато-розовый цвет. Секреторные клетки эпифиза выделяют в кровь гормон мелатонин, синтезируемый из серотонина, который участвует в синхронизации циркадных ритмов (биоритмы «сон—бодрствование») и, возможно, влияет на иммунную систему. В эпифизе вырабатываются вещества, тормозящие действие передней доли гипофиза — гонадотропного гормона и гормона роста. Вытяжка из эпифиза тормозит также действие меланофорного гормона гипофиза. Органопрепараты, вырабатываемые из эпифиза, имеют неспецифическое иммуномодулирующее, регулирующее действие на гормональный обмен, а также антикоагулянтное и противоопухолевое действие. Применение таких препаратов в медицине и ветеринарии способствует нормализации у пациентов гормонального обмена, укреплению иммунной системы, восстановлению системы свертываемости крови.

Поджелудочная железа — плоская, неправильной формы, с утолщенной головной частью, состоит в основном из железистой ткани, образующей дольки с выводными протоками, соединяющимися в общий выводящий проток железы, открывающийся в двенадцатиперстную кишку. Секрет поджелудочной железы содержит ряд ферментов.

Поджелудочные железы согласно техническим условиям должны собираться раздельно от каждого вида скота. В зависимости от вида скота железы подразделяют на полученные от крупного рогатого скота и от свиней. В зависимости от качества эти железы бывают I и II сортов. Не допускается смешение поджелудочных желез разных видов скота. Массовая доля жира (в процентах) в железах I сорта крупного рогатого скота составляет не более 5, а II сорта—не более 7, в железах I сорта свиней —не более 8, II —не более 12.

Из поджелудочной железы вырабатывают препарат инсулин. Поджелудочные железы молодых убойных животных являются наиболее ценными, так как содержат много инсулина. Массовая доля инсулина (в ЕД/кг) поджелудочной железы крупного рогатого скота и свиней I сорта должна быть не менее 5000, II сорта — 4000. Инсулин регулирует углеводный обмен, недостаток его приводит к сахарному диабету. Поджелудочная железа, кроме того, продуцирует ряд физиологически активных веществ: глюкогон (гипергликемический фактор), липокаический фактор и каликреин.

Щитовидная железа. Используют железы крупного рогатого скота и свиней. Щитовидная железа состоит из двух долей различной формы.

У крупного рогатого скота она состоит из двух долей, соединенных перешейком, у свиней перешеек крупный. Вырабатываемый железистыми клетками секрет содержит йодтиреоглобулин, из продуктов гидролиза которого получают активные гормоны — тироксин и трийодтиронин. Тиреоидин (препарат из щитовидной железы) применяют при микседемах, ожирении, почечных отеках.

Замороженные щитовидные железы должны иметь температуру не выше —20 °С.

Надпочечные железы (надпочечники) имеют различную конфигурацию. Они состоят из двух слоев: наружного — коркового и внутреннего — мозгового. В зависимости от вида животных подразделяют на надпочечники крупного рогатого скота и свиней.

Из коркового слоя выделено до 30 различных соединений, но только часть из них обладает значительной гормональной активностью и содержится в препаратах, получаемых из коркового слоя, — кортизон, кортикостерон и дезоксикортикостерон, которые обладают противовоспалительным действием.

Из мозгового слоя вырабатывают адреналин и норадреналин, повышающие давление и являющиеся антагонистами инсулина.

Яичники. Используют яичники крупного рогатого скота, свиней, овец и коз. У крупного рогатого скота они имеют удлиненно-овальную форму, у свиней — гроздевидную, у овец и коз — округлую. Цвет их у крупного рогатого скота желтовато-розовый, у свиней — красно-желтый, у овец и коз — бледно-розовый.

Яичники выделяют эстрон (фолликулин), образующийся в фолликулах, и гормон желтого тела — прогестерон, секреция которого в период беременности значительно возрастает. Из яичников и желтого тела вырабатывают препараты эстрадиол, фолликулин, прогестерон, прогестин.

Яичники заплесневевшие, загрязненные, с признаками гнилостного разложения, имеющие посторонний запах, плохо очищенные от посторонних тканей, деформированные, патологически измененные, с наличием абсцессов для производства препаратов не пригодны. Кровоизлияния в яичниках на месте лопнувшего фолликула и желтого тела дефектами не считаются.

Семенники. Используют семенники половозрелых быков, баранов и козлов. Сырые семенники идут на выработку тестостерона (гонадостимулина). Температура такого сырья должна быть не выше —20 °С.

Семенники загрязненные, имеющие посторонних запах, плохо очищенные от прирезей посторонних тканей, с атрофией железистой ткани, кистами и некрозами, гнойными обызвествленными очагами и травматическими повреждениями для получения ветеринарных препаратов не пригодны.

При заготовке семенников для производства препарата ронидазы внутреннюю оболочку с них не снимают.

Препараты, вырабатываемые из половых желез, используют в качестве лечебных средств при заболеваниях, связанных с недостаточной функцией яичников и семенников. В качестве гормонального сырья используют также плаценту стельных коров, в которой наряду с женскими половыми гормонами образуются кортикостероиды и полипептиды, обладающие действием гормонов передней доли гипофиза.

Ферментные препараты. Основным сырьем для производства ферментных препаратов является поджелудочная железа, слизистые оболочки свиных желудков и сычугов крупного рогатого скота, сычуги молочных телят и ягнят, слизистая оболочка тонких кишок, семенники быка.

1. Из поджелудочной железы получают трипсин, панкреатин медицинский и технический, химотрипсин, применяемый в медицине как противовоспалительное и противоотечное средство, эластозу и карбоксипептидазу, переваривающие белки соединительной ткани, рибонуклеазу и дезоксирибонуклеазу.

2. Из слизистой оболочки свиных желудков и сычугов крупного рогатого скота, сычугов молочных телят и ягнят, слизистой оболочки тонких кишок вырабатывают пепсины: пищевой — для створаживания молока при производстве сыров; сывороточный, используемый для гидролиза кровяной сыворотки при производстве лечебных сывороток; медицинский. Из этого же сырья получают желудочный сок, а также медицинский препарат ацедин пепсина.

Помимо ферментов в слизистой оболочке желудка образуется сокогонный гормон гастрин, влияющий на выделение соляной кислоты. Слизистая оболочка кишечника продуцирует полипептидэнтерогастрин. Вырабатываемые из слизистой оболочки желудков и кишечника гормональные и ферментные препараты используют в лечебных целях при нарушении деятельности желудочно-кишечного тракта.

3. Из семенников быка выделяют вещества, обладающие гиалуронидазной активностью — ронидазу для наружного употребления и лидазу для инъекций. Их применяют для рассасывания рубцовой ткани и повышения проницаемости тканей для различных лекарственных средств.

Из специального сырья вырабатывают широкий спектр препаратов.

Из печени вырабатывают антианемин, камполон, печеночный экстракт. Целесообразность использования печени для изготовления органопрепаратов, обладающих высоким антианемическим действием, определяется прежде всего наличием в ней витамина В₁₂ и железосодержащего белка ферритина, в котором содержится до 23 % железа.

Желчь является секретом печени. Это слегка вязкая жидкость зеленовато-бурого цвета, слабощелочной реакции. Плотность желчи 1,003. 1,006 кг/м 3 . В состав желчи входят вода, желчные кислоты (до 7 %), желчные пигменты, минеральные соли, холестерин, лецитин, жирные кислоты, нейтральный жир, мочевина, мочевая кислота. Содержание желчных кислот зависит от вида животных. Желчь крупного рогатого скота содержит холевую, дезоксихолевую, литохолевую и стерохолевую кислоты. Использование желчи связано главным образом с высоким содержанием в ней желчных кислот, физиологическая активность которых выражается в эмульгирующем воздействии на жиры и активные липазы панкреатического сока.

Желчь используют для производства холензима, желчных кислот, сухой или сгущенной желчи, аллохола.

Спинной и головной мозг. Спинной мозг крупного рогатого скота и свиней согласно действующему ГОСТу должен быть очищен от твердой и паутинной оболочек, остатков крови и мяса. В замороженном виде имеет белый цвет с разными оттенками (розовый или желтый у крупного рогатого скота и белый, розовый или серый у свиней), форма спинного мозга цилиндрическая, несколько сплющенная.

Непригоден для производства препаратов спинной мозг лимонно-желтого цвета с геморрагическими инфильтратами, выступающими на поверхности мозга в виде фокусов темно-красного или красно-коричневого цвета, гнойными очагами, участками уплотненной мозговой ткани, загрязненный, с признаками гнилостного разложения, дефростированный и вновь замороженный, с прирезями посторонних тканей и органов.

Головной мозг крупного рогатого скота должен быть без кровяных сгустков и остатков твердой мозговой оболочки, замороженный основанием книзу, бледно-розового цвета.

Непригоден для производства препаратов головной мозг загрязненный, заплесневевший, с признаками гнилостного разложения, имеющий посторонний запах, деформированный или замороженный блоком, с примесью посторонних тканей, ярко выраженной гиперемией, наличием абсцессов. Из спинного и головного мозга извлекают холестерин, лецитин. Изготовляют из спинного мозга препарат антисклеротин.

Из глазного яблока получают стекловидное тело и вырабатывают луронит; из эмбрионов убойных животных и кровяной сыворотки — растин; из молочной железы крупного рогатого скота — экстракты (маммин и маммитоцин); из хрящей — хондроитин-сульфат; из желатина — желатиноль.

Из мышц молодняка крупного рогатого скота производят аденозинтрифосфорную кислоту и ее натриевую соль, тонкие кишки овец используют для изготовления шовного материала для хирургии — кетгута.

Кровь, предназначенную для производства лечебных препаратов, собирают сразу после оглушения животных с помощью стерильного полого ножа с резиновой трубкой, через которую она поступает непосредственно в бидон или бутыль. Кровь, извлеченная из туши животного при убое, быстро свертывается (для разных видов животных по-разному, но в среднем от 3 до 15 мин). Для предотвращения свертывания кровь дефибринируют 2. 4 мин и стабилизируют, используя различные стабилизаторы. Неконсервированную кровь можно хранить не более 2 ч.

Использованный инвентарь (кровесборные сосуды, мешалки и др.) каждый раз после употребления промывают водой до исчезновения следов крови и затем пропаривают или дезинфицируют раствором антисептика (осветленным 0,3. 0,4%-ным раствором хлорной извести или 0,1. 0,2%-ным раствором хлорамина). Мойку и дезинфекцию инвентаря производят после сбора крови от каждой группы животных.

Кровь используют только от здоровых животных, поэтому после дефибринирования ее не смешивают в общем приемнике до получения результатов ветеринарно-санитарной экспертизы каждой туши и ее органов.

Из форменных элементов, имеющих много белков, содержащих металлы в органически связанной форме, вырабатывают сухой и жидкий гематоген и сухую дефибринированную кровь. Из плазмы (сыворотки), содержащей ценные белки и физиологически активные вещества, изготовляют белковые кровезаменители и белковые гидролизаты. Белковые кровезаменители — продукты переработки плазмы, в которых отсутствует видовая специфичность белков. К ним относятся БК-8, парентерин. Используют их в качестве заменителей донорской плазмы. Белковые гидролизаты — это препараты, полученные путем гидролиза белков крови кислотами (гидролизин Л-103) или ферментами (аминопептид). Кровь для выработки таких препаратов отбирается при жизни животных в особых санитарных условиях.

Выделенный из крови фибрин может служить для получения гидролизатов, выработки фибринных пленок, применяемых в медицинской практике, и производства питательных сред для микроорганизмов.

В лабораторной практике из крови вырабатывают компоненты, входящие в состав питательных сред, используемых бактериологическими лабораториями, — пептон, нормальную нативную сыворотку и др.

Из легких вырабатывают гепарин.

Сердце используют для выработки препарата миоль.

Технология получения, ветеринарно-санитарные и гигиенические условия сбора и обработки эндокринного, ферментного и специального сырья. Сырье собирают только от здоровых животных, прошедших ветеринарно-санитарный осмотр перед убоем и ветеринарносанитарную экспертизу.

При обработке эндокринных желез следует особенно строго относиться к выполнению ветеринарно-санитарных правил. Следует иметь в виду, что подавляющее большинство органопрепаратов вводится больным под кожу, поэтому каждая партия желез, как бы мала она ни была, должна обязательно сопровождаться ветеринарным свидетельством, удостоверяющим происхождение желез от здоровых животных.

В случае малейших подозрений на неблагополучие в отношении эпизоотии на мясокомбинате сбор желез должен быть немедленно прекращен до окончательного выяснения диагноза и при необходимости проведения дезинфекции. Равным образом не должны собираться железы от скота, истощенного длительным голодом или хроническими заболеваниями, приводящими к истощению (актиномикоз, туберкулез и др.).

В эндокринном и ферментном сырье нередко обнаруживают микроорганизмы: В. subtilis, В. megaterium, С. perfringens, эшерехии, сальмонеллы, протей, кокки, актиномицеты, плесневые грибы и др. Проникновение их происходит эндогенным и экзогенным путями. На санитарно-микробиологические показатели сырья влияют различные нарушения технологических режимов переработки туш животных: повреждение кишечника, удаление кишечника и внутренних органов позднее чем через 2 ч после убоя и т.д.

Эндокринное сырье собирают при разделке туш, сразу же после установления их ветеринарно-санитарного благополучия. В процессе сбора и очистки сырье должно быть тщательно отделено от посторонних тканей. При этом не допускаются порезы желез и сильное механическое воздействие на них. Порядок извлечения сырья при убое животных соответствует принятой последовательности операций переработки скота. Железы и ткани из туш животных и отдельных органов выделяют в местах, где обрабатывают соответствующие участки туши или продукты убоя. Сычуги молочных телят и ягнят, слизистую оболочку тонких кишок собирают в кишечном цехе. При сборе сырья ветеринарный врач цеха первичной переработки скота обязан контролировать соблюдение технологических инструкций и санитарно-эпидемиологических правил, регламентирующих сбор эндокринного сырья. Неправильное извлечение железы, нарушение ее анатомической целостности, как правило, приводят к полной или частичной инактивации биологической активности гормона. Обрабатывать сырье нужно сразу после извлечения. Выемка его из туши до консервирования должна проходить в течение 0,5. 1,5 ч, в зависимости от вида сырья.

Щитовидную железу извлекают после отделения голов от туловища. Каждую долю железы вырезают отдельно острым ножом из оттянутой от трахеи жировой и соединительной ткани.

Паращитовидные железы извлекают ножницами перед обработкой голов.

Поджелудочную железу извлекают из туши вместе с внутренностями, после чего ее отделяют от соседних органов вручную или с помощью ножниц или острого ножа.

Надпочечные железы извлекают из туши после нутровки путем иссечения из жировой ткани.

Яичники вынимают с помощью ножа после вскрытия нижней части брюшной полости в момент извлечения матки или вместе с внутренностями. Плаценту заготавливают от стельных коров вместе с котиледонами. Для этой цели на матке делают продольный разрез и отделяют плаценту.

Семенники собирают после разреза шкуры по белой линии. При этом перерезают семенные канатики и отделяют оболочки, покрывающие семенник, от кожных стенок мошонки.

Тимус извлекают при переработке молодняка крупного рогатого скота после распиливания грудной кости.

Гипофиз извлекают незамедлительно после разруба черепа.

Спинной мозг извлекают после распиловки туши. Для предотвращения возможности повреждения спинного мозга распил проводится на расстоянии 5. 7 мм от срединной линии.

Желчный пузырь отделяют после извлечения из туши ливера. Его разрезают и желчь выливают в бидоны через воронки, покрытые несколькими слоями марли.

Слизистые оболочки снимают сплошным слоем с предварительно вывернутых и промытых свиных желудков и сычугов крупного рогатого скота, овец и коз, не допуская прирезей жира.

Извлеченные железы и ткани собирают в специальные эмалированные, алюминиевые или из нержавеющей стали тазы и ведра. Целесообразно для сбора эндокринных желез использовать емкости, в поддон которых помещен лед, «сухой лед» или сосуды с криогенной жидкостью.

Столы для препарирования должны быть изготовлены из материалов, стойких к агрессивным средам и допущенных органами Роспотребнадзора для использования в пищевой промышленности. Устанавливают их с таким расчетом, чтобы каждый вид сырья обрабатывали на определенном месте, не смешивая с другими видами.

Отделение по обработке сырья располагают вблизи убойного цеха и холодильника. Для этих помещений устанавливают строгий санитарный режим. Они должны быть хорошо вентилируемыми, светлыми, обеспечены горячей и холодной водой и иметь установку для стерилизации инструментов, инвентаря и тары. Полы должны быть покрыты метлахской плиткой, а панели стен на высоту 1,8 м от пола отделаны глазурованной плиткой, постоянная температура не должна превышать 15 °С. Летом, особенно в солнечные дни, окна следует затемнять.

Для обработки каждого вида сырья следует использовать отдельный набор инструментов — ножницы прямые (хирургические) и изогнутые (куперовские), пинцеты. По окончании работы (смены) инструмент промывают теплой водой, тщательно вытирают насухо и протирают 96%-ным раствором спирта.

Препарирование желез следует осуществлять быстро и возможно меньше касаться их руками.

Очищенное от жировой и мышечной ткани, а также загрязнений эндокринное сырье подвергают ветеринарно-санитарному осмотру, в процессе которого отбраковывают и направляют в техническую утилизацию железы, имеющие патологически измененные ткани.

Нельзя использовать печень, пораженную инфекционными и паразитарными болезнями, при жировом перерождении, циррозе и меланозе; желудки свиные и сычуги говяжьи с признаками венозного застоя или при наличии пептических язв; семенники и яичники при атрофии и других патологических перерождениях (И. В. Шур, 1965).

Консервирование эндокринного и ферментного сырья осуществляется главным образом замораживанием. Лишь немногие виды его (гипофиз, паращитовидные железы, яичники, сычуги, спинной мозг) можно консервировать другими способами. Замораживание приостанавливает протеолитические процессы, происходящие посмертно в органах и тканях, инактивирующие в ряде случаев биологически активные вещества — гормоны.

В современных условиях замораживание осуществляется в скороморозильных шкафах при температуре от —40 до —50 °С. Такому консервированию подвергаются поджелудочная, зобная и щитовидная железы, желтые тела, надпочечники, слизистая оболочка желудка, яичники и спинной мозг. Их укладывают в специальные формы из нержавеющей стали емкостью до 2 кг.

Гипофизы, паращитовидные железы, семенники, эпифизы укладывают для замораживания одним слоем на противни. Спинной мозг в некоторых случаях перед укладкой сворачивают в виде спирали.

Если скороморозильных шкафов нет, сырье замораживают в морозильных камерах холодильников при температуре — 18°С. Возможно консервировать сырье методом сублимации.

Лиофильная сушка является лучшим методом консервирования этого сырья, так как влага испаряется из замороженного продукта и обезвоживание его заканчивается без оттаивания.

Хорошо высушенные железы должны быть твердыми и хрупкими, с содержанием влаги в них не более 10%.

Для консервирования можно использовать 96. 98%-ный раствор ацетона (гипофизы и паращитовидные железы); 96%-ный раствор спирта (яичники и желтые тела), подкисленный соляной кислотой; 94. 96%-ный раствор спирта (поджелудочная железа) с добавлением 1%-ного раствора формалина или 5. 7 %-ного едкого натра (желчь).

Упаковка и хранение. Замороженное сырье упаковывают в картонные контейнеры или плотные деревянные ящики, выложенные бумагой, и хранят в специально выделенных камерах холодильника при температуре не выше —20 °С. В этих условиях сырье может храниться до шести месяцев, кроме слизистой оболочки желудков и спинного мозга, которые хранят до года.

Транспортирование сырья требует большого внимания, поскольку переработка его сосредоточена на нескольких заводах органотерапевтических препаратов, а заготовка ведется на всех мясокомбинатах, имеющих холодильные мощности. Перевозят замороженное сырье в специальных изотермических вагонах-рефрижераторах или авторефрижераторах, в которых поддерживается температура не выше —20 °С.

Гипофизы и паращитовидные железы, высушенные ацетоном, а также яичники, консервированные спиртом, переправляют в герметически закрытых сосудах (банках с притертыми пробками или закатанных консервных банках).

Основные показатели качества сырья изложены в соответствующих ГОСТах. При контроле качества этого сырья обращают внимание на внешний вид, цвет и форму желез, осматривая их при дневном свете; определяют температуру в толще слоя желез полупроводниковым термометром и метод их консервирования, массу железы.

Железы принимают партиями. Под партией понимают любое количество желез, оформленное одним документом, удостоверяющим их качество и предназначенное к одновременной сдаче, приемке. Вначале проверке подвергают тару, при этом устанавливают ее качество и целостность, правильность маркировки, отсутствие подтеков и других дефектов. Затем приступают к осмотру сырья. Для проведения испытания из разных слоев каждого вскрытого ящика или мешочка отбирают 1 % желез, но не менее 40 шт. При этом определяют целостность железы, а также однородность и доброкачественность сырья, соответствие действующим ГОСТам и требованиям технологических инструкций.

ВАКЦИНЫ И СЫВОРОТКИ

Биологические ветеринарные препараты включают в себя следующие группы продукции с кодами ОКП: сыворотки — 93 8200, вакцины — 93 8400, анатоксины — 93 8500, бактериофаги — 93 8600, аллергены — 93 8700, диагностические препараты и питательные среды — 93 8800 (приложение 2).

Наиболее эффективным средством предупреждения инфекционных заболеваний являются вакцины. В Российской Федерации (поданным Н. В. Медуницына, 2004) производится более 60 видов вакцин. Практически все вакцины соответствуют по основным показателям безопасности и эффективности требованиям ВОЗ, но почти каждая из них нуждается в дальнейшем совершенствовании.

В нашей стране выпускаются вакцины следующих видов: живые; убитые (инактивированные); расщепленные (сплит-вакцины) и субъединичные (химические); анатоксины; рекомбинантные; с искусственным адъювантом, конъюгированные, комбинированные (комплексные).

Живые вакцины представляют собой взвесь вакцинных штаммов микроорганизмов (бактерий, вирусов, риккетсий), выращенных на различных питательных средах и отобранных в качестве вакцинных на основании комплекса предварительных испытаний. Вакцины готовятся на основе апатогенных возбудителей, аттенуированных в искусственных или естественных условиях. Аттенуированные штаммы вирусов и бактерий получают путем инактивации генов, ответственных за образование фактора вирулентности или за счет мутаций в генах, неспецифически снижающих эту вирулентность.

Убитые (инактивированные) вакцины готовятся из инактивированных культур вирулентных штаммов бактерий и вирусов, обладающих полным набором необходимых антигенов. Для инактивации возбудителей применяют нагревание, обработку формалином, ацетоном, спиртом, которые обеспечивают надлежащую инактивацию и минимальные повреждения структуры антигенов. Высушивание вакцин обеспечивает высокую стабильность препаратов и снижает концентрацию некоторых примесей (формалина, фенола).

Расщепленные (сплит-вакцины) и субъединичные (химические) вакцины имеют низкую реактогенность, высокую степень специфической безопасности и достаточную иммуногенную активность. Вирусный лизат получают обычно с помощью детергента, для очистки материала применяют различные меры: ультрафильтрацию, центрифугирование, гель-фильтрацию и др.

Химические вакцины состоят из антигенов, полученных из микроорганизмов различными способами, преимущественно химическими методами.

Анатоксины готовятся из экзотоксинов различных видов микробов. Токсины подвергаются обезвреживанию формалином, при этом они не теряют иммуногенные свойства и способность вызывать образование антител (антитоксинов).

Получение рекомбинантных вакцин включает следующие этапы: клонирование генов, обеспечивающих синтез необходимых антигенов, введение этих генов в вектор, введение векторов в клетки-продуценты (вирусы, бактерии, дрожжи и пр.), культивирование клеток in vitro, отделение антигена и его очистка, применение клеток-продуцентов в качестве вакцины.

Вакцины с искусственными адъювантами. Принцип создания таких вакцин заключается в использовании естественных антигенов и синтетических носителей.

Конъюгированные вакцины представляют собой конъюгаты полисахарида, полученного из возбудителей инфекций, и белкового носителя (дифтерийного или столбнячного анатоксина).

Комбинированные (комплексные) вакцины. Примером такой вакцины является АКДС-вакцина, включающая антитела сразу к нескольким болезнетворным микроорганизмам.

Медиаторы (цитокины) — вещества белковой природы, которые образуются в клетках, преимущественно в иммунокомпетентных, и являются средством клеточного взаимодействия, иммунологическим языком общения клеток друг с другом. Они обеспечивают теснейшую функциональную связь между разными группами клеток и образуют цитокиновую сеть, отдельные звенья которой могут обладать синергизмом или антагонистическими свойствами.

Адъювант — вещество, неспецифически усиливающее иммунный ответ на антигены.

Общие требования к качеству вакцин касаются прежде всего безопасности и специфической активности вакцин. Для обеспечения безопасности вакцин должны быть изучены и охарактеризованы свойства вакцинного штамма, клеточного субстрата, свойства полуфабриката и конечного продукта (стерильность, токсичность, пирогенность, химические и биологические примеси, добавки, контаминация и пр.).

Требованиями к специфической безопасности вакцин являются полнота инактивации токсинов, бактерий, вирусов, отсутствие остаточной вирулентности (или реверсии вирулентности) и контаминации, наличие генетической стабильности и генетической гомогенности вакцинного штамма.

Специфическая активность вакцин включает такие показатели, как количество антигена в единице объема (lf/мл, ЕС/мл) — количество живых или убитых микробных клеток, составляющих основу вакцины, а также уровень специфических антител в сыворотке крови животных, иммунизированных данной вакциной, степень защищенности таких животных на введение разрешающей дозы инфекционного агента и др.

Показатели качества биологических ветеринарных препаратов приведены в номенклатуре основных показателей качества биологических препаратов для ветеринарных целей, включаемых в технические задания на научно-исследовательскую работу по определению перспектив развития биологических препаратов, в государственные стандарты с перспективными требованиями, а также в номенклатуре показателей качества, включаемых в разрабатываемые и пересматриваемые стандарты, в технических заданиях на опытно-конструкторские работы, технических условиях, картах технического уровня и качества продукции, установленной ГОСТ 4.492—89. Номенклатура показателей качества согласно этому ГОСТу включает показатели назначения и надежности.

К показателям назначения относятся: показатели назначения бактерийных вакцин; назначения вирусных вакцин; назначения противогрибковых вакцин; назначения лечебных сывороток и гамма-глобулинов; назначения диагностических препаратов (антигены, антисыворотки, аллергены).

Основными показателями качества биологических препаратов для ветеринарных целей являются: активность; длительность иммунитета; срок годности; специфическая эффективность; безвредность; удельная трудоемкость; обобщенный показатель эффективности использования; реактогенность.

Активность — способность биопрепарата вызывать специфический эффект.

Длительность иммунитета — показатель длительности состояния специфической невосприимчивости организма по отношению к возбудителю инфекционного заболевания.

Срок годности — период времени, в течение которого препарат сохраняет свои специфические свойства.

Специфическая эффективность — доля животных либо объектов

диагностического исследования, для которой гарантирован эффект применения.

Безвредность — свойство препарата, введенного в организм животного в тест-дозе, не вызывать изменения клинического состояния.

Удельная трудоемкость — показатель затрат трудовых ресурсов. Обобщенный показатель эффективности использования — показатель, рассчитываемый как отношение полезного эффекта от использования к затратам на создание и применение препарата.

Реактогенность — свойство препарата при введении вызывать в организме какие-либо побочные эффекты.

Документация нормативного и разрешительного характера необходима для производства любого иммунобиологического препарата.

К нормативной документации относятся: государственный стандарт, фармакопейная статья или ГОСТ; технические условия (фармакопейная статья предприятия — для медицинских препаратов);

инструкция по применению препарата; регламент производства препарата.

К разрешительной документации относятся: аттестат производства препарата, выданный ФГУ ВГНКИ; лицензия на производство и реализацию препарата, выданная уполномоченным органом.

Источник